Anvendelse og bruk av fluorescensmikroskopprinsipper
Prinsipper og strukturelle egenskaper for fluorescensmikroskoper: Fluorescensmikroskoper bruker en punktlyskilde med høy lyseffektivitet for å sende ut lys med en viss bølgelengde (som ultrafiolett lys 3650 tommer eller lilla-blått lys 4200 tommer) gjennom et fargefiltersystem som eksitasjonslys til eksitere fluorescens i prøven. Etter at stoffet avgir fluorescens i forskjellige farger, blir det observert gjennom forstørrelsen av objektivlinsen og okularet. På denne måten, under en sterk kontrastbakgrunn, selv om fluorescensen er veldig svak, er den lett å identifisere og har høy følsomhet. Den brukes hovedsakelig til studiet av cellestruktur og funksjon samt kjemisk sammensetning. Den grunnleggende strukturen til et fluorescensmikroskop er sammensatt av et vanlig optisk mikroskop pluss noe tilbehør (som fluorescenslyskilde, eksitasjonsfilter, tofarget stråledeler, blokkeringsfilter, etc.). Fluorescerende lyskilde - bruker vanligvis en ultrahøytrykks kvikksølvlampe (50 til 200W), som kan sende ut lys med forskjellige bølgelengder, men hvert fluorescerende stoff har en eksitasjonsbølgelengde som produserer den sterkeste fluorescensen, så et eksitasjonsfilter ( Det finnes generelt ultrafiolette, lilla, blå og grønne eksitasjonsfiltre), som bare lar eksitasjonslyset med en viss bølgelengde passere gjennom og belyse prøven, samtidig som alt annet lys absorberes. Etter at hvert stoff er bestrålet med eksitasjonslys, avgir det synlig fluorescens med lengre bølgelengde enn bestrålingsbølgelengden på svært kort tid. Fluorescens er spesifikk og er generelt svakere enn eksitasjonslyset. For å observere spesifikk fluorescens, kreves det et blokkerende (eller undertrykkende) filter bak objektivlinsen. Den har to funksjoner: den ene er å absorbere og blokkere eksitasjonslyset fra å komme inn i okularet for å unngå å forstyrre fluorescensen og skade øynene; den andre er å velge og la spesifikk fluorescens passere gjennom for å vise en spesifikk fluorescensfarge. De to filtrene må velges og brukes sammen.
