Sammenligning mellom konfokal mikroskopi og konvensjonell optisk mikroskopi
Mikroskop er hovedverktøyet for å observere celler. I henhold til forskjellige lyskilder kan den deles inn i to kategorier: optiske mikroskoper og elektronmikroskoper. Førstnevnte bruker synlig lys (ultrafiolett mikroskop bruker ultrafiolett lys) som lyskilde, mens sistnevnte bruker elektronstråle som lyskilde. Både vanlige optiske mikroskoper og laserkonfokale mikroskoper tilhører optiske mikroskoper.
Vanlig optisk mikroskop
Et vanlig biologisk mikroskop består av tre deler, nemlig: ① lyssystem, inkludert lyskilde og kondensator; ② Det optiske forsterkningssystemet, som består av et objektiv og et okular, er hoveddelen av et mikroskop. For å eliminere sfærisk og kromatisk aberrasjon, er både okularet og objektivet sammensatt av komplekse linsegrupper Mekanisk enhet, som brukes til å fikse materialer og lette observasjon.
Klarheten til et mikroskops bilde avhenger ikke bare av forstørrelsen, men også av oppløsningen. Oppløsning refererer til evnen til et mikroskop (eller et menneskelig øye i en avstand på 25 cm fra målet) til å skille gjenstander med små intervaller. Størrelsen på oppløsningen avhenger av lysets bølgelengde, blenderåpningsindeksen og brytningsindeksen til mediet. Det uttrykkes som: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, hvor n=brytningsindeksen til mediet; =blenderåpningsvinkel (vinkelen som prøven åpner objektivets blenderåpning med), NA=numerisk blenderåpning. Er hjørnet på speilet alltid mindre enn 180?, så den maksimale verdien av zui for sina/2 må være mindre enn 1.
Brytningsindeksen til glass som brukes i produksjonen av optiske linser er 1.65-1.78, og jo nærmere brytningsindeksen til mediet som brukes er den til glass, jo bedre. For tørre objektiver er mediet luft, og blenderforholdet er vanligvis 0.05-0.95; Oljelinsen bruker sedertreolje som medium, og blenderforholdet kan være nær 1,5.
Bølgelengden til vanlig lys er {{0}}nm, så oppløsningsverdien til mikroskopet vil ikke være mindre enn 0,2 μm, og oppløsningen til det menneskelige øyet er 0,2 mm. Derfor er den maksimale forstørrelsen for mikroskopdesign vanligvis 1000X.
