Fluorescensmikroskop grunnleggende operasjon
en. Slå av lysene i rommet og slå på mikroskopets kvikksølvlampe;
b. Velg det tilsvarende filteret i henhold til fluoresceinet merket av prøven;
c. Plasser prøven og finn et passende synsfelt;
d. Hvis du trenger å ta bilder, bekreft at fargefilmen er installert i kameraet;
e. Slå på Selfie-enheten, velg det manuelle giret, vanligvis er opptakshastigheten innen 0.5-10 sekunder;
f. Etter bruk slår du av all strøm og gjør en oversikt over bruken. de
de
3. Opptaksmetode for fluorescensbilde
Fluorescensbildet sett av fluorescensmikroskopet har både morfologiske egenskaper og fluorescensfarge og lysstyrke. Når du bedømmer resultatene, må de to kombineres for en helhetlig vurdering. Resultatene registreres basert på subjektive indikatorer, det vil si visuell observasjon av arbeidere. Som en generell kvalitativ observasjon, i utgangspunktet pålitelig. Med utviklingen av teknologi og vitenskap brukes objektive indikatorer for å registrere vurderingsresultater i ulik grad, for eksempel cellespektrofotometre, bildeanalysatorer og andre instrumenter. Imidlertid må resultatene som registreres av disse instrumentene også kombineres med subjektive vurderinger. de
Fluorescensmikroskopfotografering er svært nødvendig for å ta opp fluorescensbilder. Siden fluorescens er lett å falme og svekke, er det nødvendig å registrere resultatene i sanntid. Metoden er i utgangspunktet den samme som for vanlig fotomikrografi. Trenger bare å bruke høyhastighets fotosensitiv film. Fordi ultrafiolett lys har en sterk effekt på fluorescensslukking, slik som FITC-markører, vil fluorescenslysstyrken reduseres med 50 prosent når det bestråles med ultrafiolett lys i 30 sekunder. Derfor, hvis eksponeringshastigheten er for lav, kan det fluorescerende bildet ikke tas. Generelle forskningsfluorescensmikroskoper har halvautomatiske eller helautomatiske fotomikrografisystemenheter. de
de
4. Forholdsregler for bruk av fluorescensmikroskopi
en. Betjen strengt i samsvar med kravene i fabrikkinstruksjonene for fluorescensmikroskopet, og ikke endre programmet etter ønske. de
b. Inspeksjonen bør utføres i et mørkt rom. Etter å ha kommet inn i mørkerommet, koble til strømforsyningen og tenn kvikksølvlampen med ultrahøytrykk i 5-15 minutter. Etter at det sterke lyset fra lyskilden er stabilt, er øynene fullstendig tilpasset mørkerommet, og begynner deretter å observere prøven. de
c. For å forhindre skade av ultrafiolette stråler på øynene, bruk vernebriller når du justerer lyskilden. de
d. Inspeksjonstiden er fortrinnsvis 1-2 timer hver gang. Hvis den overskrider 90 minutter, vil lysstyrken til ultrahøytrykkskvikksølvlampen gradvis avta og fluorescensen svekkes; etter at prøven er bestrålt med ultrafiolett lys i 3-5 minutter, vil fluorescensen også bli betydelig svekket; derfor bør den maksimalt ikke overstige 2-3 timer. . de
e. Levetiden til lyskilden til fluorescerende mikroskop er begrenset, og prøvene bør kontrolleres sentralt for å spare tid og beskytte lyskilden. Når været er varmt, bør vifter legges til for å spre varmen, og de nye pærene bør registreres fra begynnelsen av brukstiden. Når du vil bruke den igjen etter at lampen er slukket, må du vente til pæren er tilstrekkelig avkjølt før du tenner den. Unngå å tenne lyskilden flere ganger om dagen. de
f. Observer prøven umiddelbart etter farging, da fluorescensen gradvis vil svekkes over tid. Hvis prøven oppbevares i en polyetylenplastpose ved 4 grader, kan fluorescenssvekkelsestiden bli forsinket og monteringsmidlet kan forhindres i å fordampe. de
g. Vurderingsstandard for fluorescenslysstyrke: den er generelt delt inn i fire nivåer, det vil si "-" betyr at ingen eller svak fluorescens kan sees. "pluss" betyr at bare tydelig synlig fluorescens ble sett. " pluss pluss " betyr at lys fluorescens er synlig. " pluss pluss pluss " betyr synlig lys fluorescens.
