Fluorescensmikroskopi ferdigheter og metoder
Tekniske parametere for fluorescensmikroskop 1. Vidvinkelokular 2. Akromatisk objektivlinse 3. Objektivlinsekonverter med fire hull 4. Epifluorescensenhet Blå (B) Grønn (G) eksitasjonssystem 100W kvikksølvlampe 5. Koaksial grov- og finfokusjusteringsmekanisme: Juster Fokusområde: 15 mm Mikrobevegelsesgitterverdi: 0,002 mm 6. Dobbeltlags mekanisk bord Lengdebevegelsesområde: 70 mm Sidebevegelsesområde: 50 mm
Tekniske parametere for fluorescensmikroskop
1. Vidvinkel okular
2. Akromatisk objektivlinse
3. Nesestykke med fire åpninger
4. Epi-fluorescensenhet blå (B) grønn (G) eksitasjonssystem 100W kvikksølvlampe
5. Koaksial grov- og finfokusjusteringsmekanisme: fokusområde 15 mm finbevegelsesrutenettverdi 0.002 mm
6. Dobbeltlags mekanisk arbeidsbenk
Vertikalt bevegelsesområde: 70 mm Sidebevegelsesområde: 50 mm
Fluorescensmikroskopi ferdigheter og metoder
(1) Glasssklie
Tykkelsen på glassplaten skal være mellom 0,8 og 1,2 mm. Et objektglass som er for tykt vil absorbere mer lys på den ene siden, og på den andre siden kan ikke eksitasjonslyset konsentreres på prøven. Objektglassene må være glatte, jevne i tykkelse og fri for tydelig autofluorescens. Noen ganger brukes glassglass av kvarts.
(2) Dekkglass
Tykkelsen på dekkglasset er omtrent 0.17 mm, glatt. For å styrke eksitasjonslyset kan det også brukes et interferensdekselglass, som er et spesielt dekkglass belagt med flere lag av stoffer (som magnesiumfluorid) som har ulik interferenseffekt på lys med forskjellige bølgelengder, noe som kan gjøre at fluorescens går jevnt. Spennende lys føres gjennom og reflekteres, og dette reflekterte eksitasjonslyset begeistrer prøven.
(3) Prøve
Vevsskiver eller andre prøver bør ikke være for tykke. Hvis den er for tykk, vil mesteparten av eksitasjonslyset bli forbrukt i den nedre delen av prøven, mens den øvre delen som observeres direkte av objektivlinsen ikke vil bli fullstendig eksitert. I tillegg påvirker celleoverlapping eller urenhetsdekning vurderingen.
(4) Monteringsmiddel
Glyserin brukes ofte som monteringsmiddel, som ikke må ha noen autofluorescens, fargeløst og gjennomsiktig, og lysstyrken til fluorescensen er lysere ved pH 8.5-9.5, og det er ikke lett å falme raskt. Derfor brukes en lik blanding av glyserol og 0.5mol/l karbonatbufferløsning med en pH på 9.0 til 9.5 vanligvis som monteringsmiddel.
(5) speilolje
Vanligvis, når du observerer prøver med mørkfelts fluorescensmikroskoper og oljenedsenkningslinser, må du bruke nedsenkingsolje. Det er best å bruke spesiell ikke-fluorescerende nedsenkingsolje. Ovennevnte glyserin kan også brukes i stedet, og flytende parafin kan også brukes, men brytningsindeksen er lav, noe som har en liten innvirkning på bildekvaliteten. Innflytelse.
