Funksjoner til hvert filter i et fluorescensmikroskop
Det mest kritiske problemet med fluorescensmikroskopi er kombinasjonen av optiske filtre. Både eksitasjonsfilteret og skjermingsfilteret må være egnet for det observerte fluorescerende materialet og matchet med hverandre. For noen spesifikke applikasjoner, hvis det er feil ved valg av filtre, kan det føre til misforståelser og til og med feil resultater. Prestasjonene til fluorescensmikroskopiteknologi er uatskillelige fra høy-kvalitetsfiltre og smart tilpassede filtergrupper. Det finnes flere typer filtre for fluorescensmikroskopi.
1. Varmeabsorberende filter
Varmeabsorberende filter er et nødvendig filter for å forhindre at termisk stråling i lyskildespekteret skader det optiske systemet. Tidlige avanserte mikroskoper var utstyrt med trommelformede flasker som kunne holde destillert vann som varmeabsorberende enheter. Moderne forskningsmikroskoper i stor skala er utstyrt med varmeabsorberende glassfiltre i lyskildelysbokser eller lampekamre, som er gjennomsiktige og svakt gule glassplater. Leitz sine KG1 (2 mm) og BG38 (4 mm) filtre kan overføre nesten alle ultrafiolette og synlige lysspektre, med en lysoverføringshastighet på opptil 98 %. Den absorberer bare selektivt infrarød fototermisk stråling.
2. Eksitasjonsfilter
Eksitasjonsfiltre kan selektivt absorbere lange bølgelengdespektrallinjer og bare overføre ultrafiolett lys. Filtre for lilla, blått og grønt lys er eksitasjonsfiltre. Zeiss, Reichert, Olympus' B-serie, G-serie, BG-serie, Shotts UG-serie, Optons H, G, BP-serie, Leitz sin BP-serie og andre optiske filtre er alle eksitasjonsfiltre.
3. Blokkerende filter
Et blokkeringsfilter er et filter som selektivt absorberer kortbølgespektrallinjer og infrarøde stråler samtidig som lengre bølger kan sees. Dens funksjon er å gjøre det mulig for observatøren å se fluorescensen eksitert av objektet som inspiseres, samtidig som observatørens hornhinne beskyttes mot UV-skader.
4. Fargeseparasjonsfilter
Fargeseparasjonsfilter er et filterspeil som reflekterer eksitasjonslys på objektet som inspiseres, noe som får objektet til å avgi fluorescens, og deretter overfører fluorescensen til okularet. Denne typen filter kan kun brukes i en kondensator med fallende lys, mens et fluorescensmikroskop med transmittert lys ikke krever fargeseparasjon.
5. Interferensfilter
Interferensfilter er en type-eksitasjonsfilter med høy ytelse. Det er et filter laget ved å stable flere tynne metallfilmer mellom to polerte glassplater. Brytningsindeksen til hver tynn metallfilm er forskjellig, så spektrallinjene for forskjellige bølgelengder til belysningslyskilden reflekteres gjentatte ganger på hver metallfilm. Noen spektrallinjer med visse bølgelengder kanselleres av destruktiv interferens, mens andre forsterkes av additiv interferens og sendes gjennom. Dette resulterer i et filter med et smalt transmisjonsspektrum og en halv toppbredde på bare 6-20nm. Transmittansen kan nå 60% -70%.
