Bildemetoder for lyse og mørke felt av fluorescensmikroskopi
(1) Bright field imaging (BFI), som bare lar de overførte elektronene i det paraksiale området passere gjennom objektivåpningen, og danner et mørkt bilde på en lys bakgrunn. Jo mindre blenderåpningen til objektivlinsen er, desto større er kontrasten til det lyse feltbildet; (2) Dark field imaging (DFI), som bare lar en del av en spredt stråle med stor vinkel eller en diffraksjonsstråle av en krystall passere gjennom objektivlinseåpningen, mens den blokkerer den transmitterte strålen. Dette skaper et lyst grafisk bilde på en mørk bakgrunn. Denne mørkefeltsavbildningsmetoden kan forbedre kontrasten til bilder og er en viktig avbildningsmetode.
Det er omtrent fire metoder for fluorescensmikroskopi for å oppnå mørkfeltsavbildning: (1) opprettholde vertikal belysning langs den optiske aksen mens du beveger objektivåpningen; (2) Bruken av skrå belysning for å oppnå spredte stråler i den optiske akseretningen kalles Center Dark Field Imaging (CDFI); (3) En objektivlinseåpning med en sentral stråleblokkering og et sirkulært gjennomsiktig område; (4) Bruk en sirkulær gjennomsiktig spotlight for å oppdage lys og en objektivåpning med et sentralt sirkulært hull. * Metodene her er enkle og praktiske, men de bruker elektronisk bildebehandling i det fjerne ermet, noe som resulterer i store aberrasjoner og dårlig bildekvalitet. Den andre metoden kan unngå de ovennevnte ulempene, men objektivåpningen til Leica-fluorescensmikroskopet mottar bare en liten del av spredte diffrakterte elektroner, noe som resulterer i lavere effektivitet. Siden av blenderåpningen blir ofte bombardert av et stort antall elektroner, som lett kan forårsake asymmetrisk forurensning og påvirke bildekvaliteten. Det sirkulære målet er forbedret i denne forbindelse, men ulempen er at det er vanskelig å lage og det er vanskelig å oppnå fullstendig aksial symmetri. Gitt de relativt avslappede kravene til belysningssystemet, kan sistnevnte løsning tas i bruk, som innebærer å legge til en sirkulær åpning ved kondensatoren for å gi hul belysning for prøven. Effekten av denne enheten. Bildeoppløsningen kan være nær oppløsningen til lyse feltbilder, mens kontrasten er kraftig forbedret.
