Introduksjon til å velge mellom inverterte mikroskoper og fluorescensmikroskoper
Mikroskop er et viktig instrument i cellekultur og relaterte derivateksperimenter. For tiden finnes det ulike typer mikroskoper på markedet, og det er en utfordring å velge et mikroskop som dekker behovene og egner seg. Nedenfor vil vi introdusere prinsippene for inverterte mikroskoper og fluorescensmikroskoper for enkelt valg.
Sammensetningen av et invertert mikroskop er den samme som et vanlig mikroskop, hovedsakelig bestående av tre deler: mekanisk del, belysningsdel og optisk del. Sammensetningen av et invertert mikroskop er det samme som et vanlig oppreist mikroskop, bortsett fra at objektivlinsen og belysningssystemet er reversert, med førstnevnte under scenen og sistnevnte over scenen. Denne strukturen tillater en betydelig økning i den effektive avstanden mellom lysfokuseringssystemet og scenen, noe som gjør det lettere å plassere tykkere observasjonsinstrumenter som kulturskåler og cellekulturflasker (selvfølgelig er glassglass også akseptable), mens arbeidsavstanden mellom objektivlinsen og materialet ikke trenger å være veldig stor. Invertert mikroskop brukes av medisinske og helseinstitusjoner, universiteter og forskningsinstitutter for å observere mikroorganismer, celler, bakterier, vevskultur, suspensjoner, sedimenter osv. Det kan kontinuerlig observere prosessen med celle- og bakteriell reproduksjon og deling i kulturmediet, og kan fange opp enhver tilstand under denne prosessen. Mye brukt i felt som cytologi, parasitologi, onkologi, immunologi, genteknologi, industriell mikrobiologi, botanikk, etc.
Fluorescensmikroskopi brukes til å studere absorpsjon, transport, distribusjon og lokalisering av stoffer i celler. For det testede objektet er det to måter å generere fluorescens på: spontan fluorescens, som direkte avgir fluorescens etter UV-bestråling; Sekundær fluorescens oppstår når det observerte objektet behandles med fluorescerende fargestoffer og deretter bestråles med ultrafiolett lys for å avgi fluorescens. Noen stoffer i celler, som klorofyll, produserer spontan fluorescens når de utsettes for ultrafiolett stråling; Noen stoffer kan i seg selv ikke avgi fluorescens, men hvis de er farget med fluorescerende fargestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også avgi sekundær fluorescens etter å ha blitt bestrålt med ultrafiolett lys. Fluorescensmikroskop bruker en svært effektiv punktlyskilde for å sende ut en viss bølgelengde av lys (ultrafiolett lys 365 nm eller lilla blått lys 420 nm) gjennom et fargefiltersystem som eksitasjonslys, som eksiterer de fluorescerende stoffene inne i prøven til å sende ut forskjellige farger av fluorescens gjennom objektivet, og deretter observere øyestykket. På denne måten, selv med svak fluorescens i sterk bakgrunn, er den lett å gjenkjenne og har høy følsomhet. Den brukes hovedsakelig til studiet av cellestruktur, funksjon og kjemisk sammensetning.
