Tekniske parametere og bruksferdigheter for fluorescensmikroskop
Tekniske parametere for fluorescensmikroskop 1. Vidvinkelokular 2. Akromatisk objektivlinse 3. Objektivlinsekonverter med fire hull 4. Fallende fluorescensenhet Blå (B) Grønn (G) eksitasjonssystem 100W kvikksølvlampe 5. Koaksial grov mikrofokuseringsmekanisme: fokuseringsområde 15 mm Mikronettverdi 0,002 mm 6. Tolags mekanisk arbeidsbenk langsgående bevegelsesområde: 70 mm Sidebevegelsesområde: 50 mm
Tekniske parametere for fluorescensmikroskop
1. Vidvinkel okular
2. Akromatisk objektivlinse
3. Objektivlinsekonverter med fire hull
4. Fallende fluorescensenhet Blå (B) Grønn (G) eksitasjonssystem 100W kvikksølvlampe
Koaksial grovmikrofokuseringsmekanisme: fokuseringsområde: 15 mm, mikrorutenettverdi: 0.002 mm
6. Dobbeltlags mekanisk arbeidsbenk
Lengdegående bevegelsesområde: 70 mm Sidebevegelsesområde: 50 mm
Tips og metoder for bruk av fluorescensmikroskopi
（1） Skyv
Tykkelsen på lysbildet skal være mellom 0,8 og 1,2 mm. Hvis objektglasset er for tykt, absorberer det på den ene siden for mye lys, og på den annen side kan det ikke føre til at eksitasjonslys samler seg på prøven. Objektglasset skal være glatt og rent, med jevn tykkelse og uten vesentlig spontan fluorescens. Noen ganger er det nødvendig med glassglass av kvarts.
（2） Dekkglass
Tykkelsen på dekkglasset er omtrent 0.17 mm, og det er glatt og rent. For å øke eksitasjonen kan interferensdekselglass også brukes. Dette er et spesielt dekkglass belagt med flere lag med stoffer (som magnesiumfluorid) som har ulik interferenseffekt på ulike bølgelengder av lys. Den kan tillate fluorescens å passere jevnt, mens den reflekterer eksitasjon, som kan eksitere prøven.
（3） Prøve
Vevsseksjoner eller andre prøver bør ikke være for tykke. For eksempel, hvis de er for tykke, forbrukes mesteparten av eksitasjonslyset i den nedre delen av prøven, mens den øvre delen som direkte observeres av objektivlinsen ikke er tilstrekkelig eksitert. I tillegg kan celleoverlapping eller urenhetsmaskering påvirke dømmekraften.
（4） Monteringsmiddel
Glyserin brukes ofte som monteringsmiddel, og det må være fritt for spontan fluorescens, fargeløst og gjennomsiktig. Lysstyrken til fluorescensen er lysere ved pH 8,5 til 9,5, og det er ikke lett å falme raskt. Derfor brukes vanligvis en ekvivalent blanding av glyserol og 0.5 mol/l karbonatbufferløsning med en pH på 9.0 til 9.5 som monteringsmiddel.
（5） Speil olje
Generelt, når du bruker et mørkt felt fluorescensmikroskop og oljemikroskop for å observere prøver, er det nødvendig å bruke linseolje. Det er best å bruke en spesiell ikke-fluorescerende linseolje, som også kan erstattes av den nevnte glyserolen. Flytende parafin kan også brukes, men brytningsindeksen er lav, noe som har en liten innvirkning på bildekvaliteten.
