Rollen til hvert filter i fluorescensmikroskopi
Det mest avgjørende problemet med fluorescensmikroskopi er kombinasjonen av filtre, og både eksitasjonsfilteret og skjermingsfilteret må være egnet for den observerte fluorescerende kroppen og matchet med hverandre. For visse spesifikke formål, hvis det er en feil ved valg av filter, kan det føre til misforståelser og til og med feil resultater. Prestasjonene til fluorescensmikroskopiteknologi og bruken av høykvalitetsfiltre og geniale filtergrupper er uatskillelige. Det finnes flere typer filtre for fluorescensmikroskopi.
1. Varmeabsorberende filter
Varmeabsorberende filter er et nødvendig filter for å forhindre at termisk stråling i lyskildespekteret skader den optiske enhetsgruppen. Tidlige avanserte mikroskoper var utstyrt med trommelformede flasker som kunne holde destillert vann som varmeabsorberende enheter. Moderne storskala forskningsmikroskoper er utstyrt med varmeabsorberende glassfiltre i lyskildelysbokser eller -kamre, som er gjennomsiktige, svakt gule glassplater. Leitz sine KG1 (2 mm) og BG38 (4 mm) filtre kan overføre nesten alle ultrafiolette og synlige lysspektre, noe som gjør dem til filtre med en lysstrøm på opptil 98 %. Den absorberer bare selektivt infrarøde fototermiske strålingslinjer.
2. Eksitasjonsfilter
Eksitasjonsfiltre kan selektivt absorbere lange bølgelengdespektrallinjer og bare overføre ultrafiolett lys. Filtre for lilla, blått og grønt lys er eksitasjonsfiltre. Zeiss, Reichert, Olympus B-serien, G-serien, BG-serien, Shott UG-serien, Opton H, G, BP-serien, Leitz BP-serien og andre filtre er alle eksitasjonsfiltre.
3. Blokkerende filter
Blokkeringsfilter er et filter som selektivt absorberer spektrallinjer med korte bølgelengder og infrarød stråling, slik at observatøren kan se fluorescensen som sendes ut av objektet som testes, samtidig som det beskytter hornhinnen mot UV-skader.
4. Fargelysseparasjonsfilter
Fargelysseparasjonsfilter er et filter som reflekterer eksitasjonslyset på objektet som testes, noe som får objektet til å avgi fluorescens, og deretter overfører fluorescensen til okularet. Denne typen filter kan kun brukes i fallende strålekonsentratorer, mens transmisjonslysfluorescensmikroskopi ikke krever fargeseparasjon.
5. Interferensfilter
Interferensfilter er en type høyytelses eksitasjonsfilter. Det er et filter laget ved å stable flere tynne metallfilmer mellom to polerte glassplater. Brytningsindeksen til hver tynn metallfilm er forskjellig, så spektrallinjene med forskjellige bølgelengder til belysningslyskilden reflekteres gjentatte ganger på hver metallfilm, noe som får noen bølgelengder til spektrallinjer til å oppheve på grunn av ødeleggende interferens, mens andre forsterkes av additiv interferens og overføres gjennom. Dette resulterer i et filter med et smalt transmisjonsspektrum, en halv toppbredde på bare 6~20nm, og en transmittans på 60%~70%.
