Oppreist biofluorescensmikroskop
Prinsippet om fluorescensmikroskopi er å bruke en meget effektiv punktlyskilde (for eksempel en ultrahøyt trykkkvikksølvlampe) for å avgi en viss bølgelengde av lys (for eksempel ultrafiolett lys 3650 λ eller lilla blått lys 4200 λ) gjennom et fargefiltersystem som eksitasjonslys, som inkluderer lysstoffer. Deretter filtreres det av et blokkerende (eller undertrykkende) filter bak objektivlinsen og observert gjennom forstørrelseseffekten av okularet.
Blokkeringsfilteret har to funksjoner: For det første absorberer det og blokkerer eksitasjonslys fra å komme inn i okularet for å unngå å forstyrre fluorescens og skade øynene; Det andre er å velge og la spesifikk fluorescens passere gjennom, og viser en spesifikk lysstofffarge.
Fluorescensmikroskop kan deles inn i to typer basert på prinsippet om lysbane:
1. Transmisjonsfluorescensmikroskop
Eldre fluorescensmikroskop bruker søkelyset for å begeistre fluorescens ved å passere eksitasjonslyskilden gjennom prøvematerialet. Fordelen er sterk fluorescens ved lav forstørrelse, men ulempen er at fluorescensen avtar med økende forstørrelse. Så det er bare egnet for å observere større prøvematerialer.
2. Fallende lysfluorescensmikroskop
Eksitasjonslyset faller ned fra objektivlinsen på overflaten av prøven, ved å bruke det samme objektlinsen som belysningskondensatoren og objektivlinsen for å samle fluorescens.
En dobbel fargestrålsplitter (dikroisk speil) må tilsettes den optiske banen, som danner en 45 graders vinkel med den optiske aksen. Eksitasjonslyset reflekteres i objektivlinsen og fokuserer på prøven. Fluorescensen som genereres av prøven, så vel som eksitasjonslyset som reflekteres fra overflaten av objektivlinsen og dekkglasset, går inn i objektivlinsen samtidig og går tilbake til den dobbelte fargestrålsplitteren for å skille eksitasjonslyset og fluorescensen. Det gjenværende eksitasjonslyset blokkeres deretter av filterabsorpsjonen. Hvis forskjellige kombinasjoner av eksitasjonsfilter, dobbeltfargestråleseparatorer og blokkerende filtre brukes, kan de imøtekomme behovene til forskjellige fluorescerende reaksjonsprodukter.
Fordelene med dette fluorescensmikroskopet er ensartet feltbelysning, tydelig avbildning og sterkere fluorescens med større forstørrelse.
