Hva er prøvekravene for lysmikroskopi?
I prøveforberedelsesprosessen til det optiske mikroskopet er tykkelsen på prøvestykket mellom 2 og 25um; tykkelsen på skiven av elektronmikroskopet er innenfor 50-100nm (bortsett fra høyspenningselektronmikroskopet, kan tykkelsen på prøven nå 1um), så skjæremetoden som brukes er ikke den samme.
Når det gjelder bæreren, er bæreren til den optiske mikroskopseksjonen en glassplate, og bæreren til elektronmikroskopseksjonen er bærernettet.
Når det gjelder fiksering, fikseres optiske mikroskopseksjoner med et sammensatt fiksativ, mens elektronmikroskopseksjoner festes gjentatte ganger med et enkelt fiksativ.
Når det gjelder farging, er fargingen av optiske prøver relativt enkel. I henhold til ulike observasjonsprøver og typen optisk mikroskop er det vanligvis nok å bruke noen faste flekker. Det finnes mange metoder for re-farging av elektronmikroskopprøver, og de er også svært kompliserte, som negativ farging, sølvfarging og så videre.
Når det gjelder innstøping, brukes parafin, kollodium, gelatin, etc. som innstøpningsmidler for optiske mikroskopseksjoner; epoksyharpiks, polystyrenharpiks, isobutylenharpiks og vannløselig harpiks brukes som innstøpningsmidler for elektronmikroskopseksjoner.
For å få mikroskopets synsfelt til å motta jevn og tilstrekkelig belysning, er det nødvendig å justere det optiske banesystemet for belysning når mikroskopet først installeres og feilsøkes. krav. I tillegg er riktig grep om justeringen av det optiske banesystemet for belysning et nødvendig trinn etter å ha byttet lyspæren i prosessen med å bruke mikroskopet, og det er også et nødvendig middel for å teste ytelsen til mikroskopet fra tid til annen i daglig bruksprosess. Justeringen av mikroskopbelysningens optiske banesystem inkluderer hovedsakelig følgende 4 elementer: 1. Foreløpig justering av lyskildens lampekammer utenfor mikroskopet ① Først åpner du skallet til lampekammeret og setter halogenpæren inn i sokkelen ved å trykke på fjærklippet. Smuss som fingeravtrykk på pæren vil påvirke levetiden til pæren. ②Plasser lamperommet på bordet, etter å ha slått på strømmen, bruk en spesiell skrutrekker for å justere fokuseringsknotten på lampen (merket med "←→"), slik at glødetråden projiseres på veggen 1-2 m unna, og filamentbildet justeres. Juster deretter høyden på lampen for å justere glødehullet (merket med "──") for å gjøre glødeposisjonen passende; Juster deretter venstre og høyre posisjonsjusteringsskruehull på lampen (merket med "──") for å gjøre venstre og høyre posisjon av glødetråden passende .
2. Hensikten med inspeksjonen og korrigeringen av posisjonen til lyskildebelysningsinstrumentet (glødetråden) i mikroskopet er å justere bildeenden av belysningsinstrumentet inn i synsfeltet til objektivlinsen, og å sikre at synsfeltet av mikroskopet mottas fullstendig og jevnt fra lyskildens perspektiv. Belysning, som er en forutsetning for justering av Kühler-lyssystemet. Grunnleggende verktøy som kreves: Sentreringsteleskoper er utstyrt med mikroskopkjøp. ① Koble fra den frostede glasshylsen i lampehuset og sett lampehuset tilbake på mikroskopet ② Velg en 10× objektivlinse, slå på lyskildeprogrammet for å finne prøven og juster fokus tydelig, og bruk deretter et 40× objektiv linse for å fokusere prøven tydelig (40× objektivlinse Hele bildet av filamentet kan sees tydelig); ③ Åpne både blenderåpningen og feltmembranen til kondensatoren maksimalt; ④ Koble fra et av okularene, erstatt det med et sentreringsteleskop, ta tak i den hvite delen og forleng det svarte okularet med den andre hånden. Filamentbildet kan sees i synsfeltet; ⑤Hvis filamentposisjonen ikke er egnet, juster "──"-hullet, juster filamentbildet i horisontal retning, juster "──"-hullet og juster filamentbildet i vertikal retning til Juster filamentbildet til et sirkulært bilde som bare fyller blenderåpningen til objektivlinsen; ⑥ Etter justeringen, sett inn den frostede glasshylsen tilbake til sin opprinnelige posisjon, koble fra sentreringsteleskopet og sett på okularet for neste justering. Den ovennevnte justeringen av belysningslyskildelamperommet utenfor mikroskopet og kalibreringen av posisjonen til lyskildebelysningsinstrumentet inne i mikroskopet trenger bare å utføres når mikroskopet er installert og feilsøkt for første gang og pæren er erstattet. I tilfelle forvirring kan du gjenopprette den til den opprinnelige tilstanden i henhold til trinnene ovenfor.
3. Riktig justering av Kohler-belysningssystemet (Kohler) Riktig justering av mikroskopet, en av hovedoppgavene er justeringen av belysningslysbanesystemet, og nøkkelen er justeringen av Kohler-belysningssystemet. For alle som bruker mikroskop, spesielt de som tar mikroskoper, bør de ha en viss forståelse og mestring av prinsippene for Kühler belysningssystemet og dets justeringstrinn, slik at de kan gi fullt spill til mikroskopets funksjoner. De resulterende bildene kan være mer konsistente og perfekte i effekt. Prinsippet til Kühler-belysningssystemet er ganske enkelt: lyset som sendes ut av et hvilket som helst punkt på lyskildebelysningsinstrumentet kan lyse opp synsfeltet til mikroskopet, og lyset som sendes ut av hvert punkt på lyskildebelysningsinstrumentet samles, og det er i synsfeltet til mikroskopet. En svært tilstrekkelig og jevn belysning oppnås. Hensikten med å justere Kuhler-belysningssystemet er å oppnå jevn og tilstrekkelig belysning for det observerte synsfeltet, og forhindre at strølys påvirker eller forstyrrer bildesystemet, for å unngå dannelse av tåke på negativet under fotografering. Viktige komponenter i et høyt justert Kühler-belysningssystem: feltmembran, kondensatorsystem med aksejustering. ① Velg 10× objektivlinse og 10× okular ② Sett frontlinsen på kondensatoren inn i den optiske banen, juster blenderåpningen til en moderat posisjon (ikke for stor eller ikke for liten), og hev deretter kondensatoren til toppposisjonen, og juster kondensatorens dreieskive til lysfelt "J"-posisjon ③ Juster feltmembranen til minimum (0,1)
④ Sett den forseglede biologiske prøven på scenen, slå på lyskilden og fokuser tydelig
⑤ Et lokalt opplyst område eller lyspunkt vil vises i synsfeltet, som er et uskarpt bilde av feltmembranen, der detaljene til prøven kan sees tydelig; Se detaljene i prøven tydelig
⑥ Senk kondensatoren litt, slik at det lyse punktet i synsfeltet gradvis smalner av og gradvis blir et klart polygonalt bilde, som er det klare bildet av feltmembranen;
⑦ Under normale omstendigheter er det polygonale bildet ikke i sentrum av synsfeltet. Det er nødvendig å justere et par sentreringsskruer til kondensatoren for å justere det polygonale bildet av synsfeltet til midtposisjonen;
⑧ Åpne synsfeltmembranen gradvis for å få det polygonale bildet til å bli en innskrevet polygon i synsfeltet, og kontroller justeringstilstanden ytterligere. Hvis justeringen ikke er ideell, fortsett å justere justeringsskruen litt;
⑨ Åpne feltdiafragmaen litt for å få det polygonale bildet til å forsvinne på kanten av synsfeltet. På dette tidspunktet er justeringen av Kühler-lyssystemet fullført. Etter at Kühler-belysningssystemet var justert, ble hele synsfeltet belyst jevnt, og mikrofotografiene var lyse og klare med normal kontrast.
