Hvorfor trenger vi et konfokalt mikroskop?
1. Etter innsatsen og forbedringene til våre store forgjengere, har det optiske mikroskopet nådd et perfekt nivå. Faktisk kan vanlige mikroskoper gi oss vakre mikroskopiske bilder enkelt og raskt. Imidlertid skjedde hendelsen som brakte revolusjonerende innovasjon til denne nesten perfekte mikroskopverdenen, som var oppfinnelsen av "laserskanningskonfokalmikroskopet". Karakteristisk for denne nye typen mikroskop er at den tar i bruk et optisk system som kun trekker ut bildeinformasjon fra overflaten der fokuset er konsentrert. Ved å endre fokus mens den gjenoppretter den innhentede informasjonen i bildeminnet, kan den oppnå et levende bilde med fullstendig tredimensjonal informasjonsintelligens. Gjennom denne metoden kan informasjon om overflateform som ikke kan bekreftes med konvensjonelle mikroskoper enkelt fås. I tillegg, for typiske optiske mikroskoper, er "forbedring av oppløsning" og "utdyping av fokaldybde" motstridende forhold, spesielt ved høy forstørrelse. Men i konfokale mikroskoper løses dette problemet enkelt.
2. Fordeler med konfokale optiske systemer
Skjematisk diagram av laserkonfokalmikroskop
Det konfokale optiske systemet brukes til å belyse prøven med punkter, mens det reflekterte lyset også mottas av en punktsensor. Når prøven er plassert i brennpunktet, kan nesten alt det reflekterte lyset nå den lysfølsomme enheten. Når prøven avviker fra brennpunktet, kan ikke det reflekterte lyset nå den lysfølsomme enheten. Det vil si at i et konfokalt optisk system vil kun bilder som sammenfaller med brennpunktet sendes ut, og lysflekken og ubrukelig spredt lys vil bli skjermet.
Hvorfor bruke laser?
I et konfokalt optisk system belyses prøven og det reflekterte lyset mottas også av en punktsensor. Derfor blir punktlyskilder nødvendig. Laser er en veldig punktlyskilde. I de fleste tilfeller er lyskilden til et konfokalt mikroskop en laserlyskilde. I tillegg er monokromatisiteten, retningsevnen og den utmerkede stråleformen til lasere også viktige årsaker til at de er utbredt.
4. Sanntidsobservasjon basert på høyhastighetsskanning blir mulig
Laserskanningen bruker akustisk optisk deflektor (AO prime) i horisontal retning og Servo Galvano-speil i vertikal retning. På grunn av fraværet av mekaniske vibrasjoner i den optiske forspenningsenheten for lyd, er det mulig å utføre høyhastighetsskanning og observere i sanntid på overvåkingsskjermen. Høyhastighetsnaturen til denne typen kamera er en svært viktig gjenstand som direkte påvirker hastigheten på fokusering og posisjonshenting.
5. Sammenheng mellom fokusposisjon og lysstyrke
I et konfokalt optisk system er lysstyrken til prøven høy når den er riktig plassert i brennpunktet, og lysstyrken reduseres kraftig før og etter den (heltrukken linje i figur 4). Den følsomme selektiviteten til dette fokalplanet er nettopp prinsippet bak bestemmelsen av høyderetningen og utvidelsen av fokaldybden i konfokalmikroskopi. Sammenlignet med dette viser typiske optiske mikroskoper ikke signifikante lysstyrkeendringer før og etter fokusposisjonen (stiplet linje i figur 4).
6. Høy kontrast og oppløsning
Vanligvis, i optiske mikroskoper, vil det reflekterte lyset som avviker fra brennpunktet oppstå
