Hvorfor trenger du å bruke et konfokalt mikroskop?
1. Optiske mikroskoper har nådd en tilstand av perfeksjon gjennom innsatsen og forbedringene til våre store forgjengere. Faktisk kan vanlige mikroskoper gi oss vakre mikroskopiske bilder enkelt og raskt. Imidlertid skjedde det en hendelse som brakte revolusjonerende innovasjon til denne nesten perfekte verden av mikroskopi. Dette var oppfinnelsen av "laserskannende konfokalmikroskop." Karakteristisk for denne nye typen mikroskop er at den bruker et optisk system som trekker ut bildeinformasjon kun på overflaten der fokuset er fokusert, og gjenoppretter den innhentede informasjonen i bildeminnet samtidig som den endrer fokus, og får dermed fullstendig 3D-informasjon. Et levende bilde av intelligens. Gjennom denne metoden kan informasjon om overflateformen som ikke kan bekreftes med et vanlig mikroskop enkelt fås. I tillegg, for vanlige optiske mikroskoper, er «økende oppløsning» og «utdyping av fokusdybde» motstridende forhold, spesielt ved høye forstørrelser. Men i konfokal mikroskopi løses dette problemet enkelt.
2. Fordeler med konfokalt optisk system
Det konfokale optiske systemet utfører punktbelysning på prøven, og det reflekterte lyset bruker også en punktreseptor for å motta lyset. Når prøven er plassert i fokusposisjonen, kan nesten alt det reflekterte lyset nå fotoreseptoren. Når prøven er ute av fokus, kan ikke det reflekterte lyset nå fotoreseptoren. Med andre ord, i det konfokale optiske systemet vil bare bildet som faller sammen med fokuset sendes ut, og lysflekkene og ubrukelig spredt lys vil bli skjermet.
3. Hvorfor bruke laser?
I det konfokale optiske systemet belyses prøven ved et punkt, og det reflekterte lyset mottas også ved hjelp av en punktfotoreseptor. Derfor blir punktlyskilder nødvendig. Lasere er veldig punktlyskilder. I de fleste tilfeller bruker lyskilden til konfokale mikroskoper laserlyskilder. I tillegg er egenskapene til laser som monokromaticitet, retningsevne og utmerket stråleform også viktige årsaker til dens utbredte bruk.
4. Sanntidsobservasjon basert på høyhastighetsskanning blir mulig
For laserskanning brukes en akustisk optisk deflektor (AO-element) i horisontal retning og et servo elektrisk styrt stråleskannespeil (Servo Galvano-speil) i vertikal retning. Siden den akustisk-optiske avbøyningsenheten ikke har en mekanisk vibrasjonsdel, kan den skanne med høy hastighet, noe som gjør sanntidsobservasjon mulig på overvåkingsskjermen. Den høye hastigheten til denne typen bildebehandling er et veldig viktig element som direkte påvirker hastigheten på fokusering og posisjonshenting.
5. Forholdet mellom fokusposisjon og lysstyrke
I det konfokale optiske systemet er lysstyrken maksimal når prøven er riktig plassert i fokusposisjonen, og lysstyrken vil reduseres kraftig foran og bak (heltrukken linje i figur 4). Denne følsomme selektiviteten til fokalplanet er også prinsippet bak høyderetningsbestemmelsen og fokusdybdeutvidelsen til det konfokale mikroskopet. I motsetning til dette har et normalt optisk mikroskop ikke tydelige lysstyrkeendringer før og etter fokusposisjonen (stiplet linje i figur 4).
6. Høy kontrast og høy oppløsning
I vanlige optiske mikroskoper vil det reflekterte lyset fra den ufokuserte delen forstyrre og overlappe med fokusavbildningsdelen, noe som resulterer i en reduksjon i bildekontrasten. I kontrast, i det konfokale optiske systemet, fjernes strølys utenfor fokuset og strølys inne i objektivlinsen nesten fullstendig, slik at et bilde med svært høy kontrast kan oppnås. I tillegg, fordi lyset passerer gjennom objektivlinsen to ganger, skjerpes punktbildet, noe som også forbedrer oppløsningsevnen til mikroskopet.
