Arbeidsprinsipp for laserkonfokalmikroskop
Arbeidsprinsipp for laserkonfokalmikroskop
Olympus laserkonfokalmikroskop er en detektor som kan motta signaler. Arbeidsprinsippet er at en punktlyskilde vil bli avbildet som en forstørret flekk kalt "Airy disk" etter å ha passert gjennom et fluorescensmikroskop. I et standard interferometrisk konfokalmikroskop med hvitt lys, blokkeres lys som sendes ut utenfor fokalplanet av et nålehull hvis størrelse bestemmer hvor mye av Airy-disken som kan komme inn i detektoren. Jo mindre pinhole, desto skarpere blir bildet, og jo svakere blir bildet fordi det meste av lyset går tapt. Jo mindre pinnehullet er, jo bedre oppløsning, men – igjen – jo mer lyssignal går tapt. Olympus laserkonfokalmikroskop kan gi et farge CCD-bilde og et konfokalt laserskanningsbilde på samme tid. Olympus konfokale lasermikroskoper er i stand til høydemåling gjennom et konfokalt oppsett av én lyskilde, én prøve og én detektor. Når prøven er plassert ved fokalplanet til objektivlinsen og laserlyset som reflekteres fra prøveoverflaten fokuseres inn i den konfokale blenderåpningen, vil fotodetektoren motta signalet fra prøven. Når prøven er i ufokusert posisjon, mottar ikke den konfokale blenderåpningen lasersignalet, så kun fokussignalet samles inn. Denne funksjonen kan realisere den optiske seksjoneringsfunksjonen til Olympus laserkonfokalmikroskop.
Fordeler med konfokal lasermikroskopi
1. Ved å bruke laserlys som lyskilde, etter at de tilsvarende fluorescerende probene er merket, skannes prøven punkt for punkt for å oppnå todimensjonale optiske tverrsnittsbilder lag for lag. Den har funksjonen "celle-CT" og kan støttes av datamaskinens tredimensjonale rekonstruksjonsprogramvare for å oppnå tredimensjonale bilder, som kan roteres i alle vinkler for å observere den tredimensjonale formen og romlige forholdet til celler og vev;
2. Den kan observere levende celler og vev uten skade, og dynamisk måle den fysiologiske informasjonen til levende celler som Ca-ionkonsentrasjon og pH-verdi i celler;
3. Den kan måle fluiditeten til cellemembranen, intercellulær kommunikasjon, cellefusjon, cytoskjelettets elastisitet, etc., og kan brukes som en "lett kniv" for å fullføre intracellulær "kirurgi". Denne teknologien muliggjør in situ dynamisk og kvantitativ observasjon og måling av levende celler og vev.
