Bestemmelse av antall mikroorganismer - mikroskopisk direkte tellemetode!
Fundamental
Mikroskopisk direkte tellemetode er en enkel, rask og intuitiv metode for å plassere en liten mengde av suspensjonen av prøven som skal testes på et spesielt glassglass (også kjent som en bakterieteller) med et bestemt areal og volum, og telle direkte under et mikroskop. For tiden inkluderer de mest brukte bakterietellerne i inn- og utland: blodcelleteller, Peteroff-Hauser bakterieteller og Hawksley bakterieteller osv. De kan alle brukes til å telle suspensjoner som gjær, bakterier og muggsporer, og de grunnleggende prinsippene er de samme. De to sistnevnte bakterietellerne har et totalt volum på 0.02mm3 etter å ha blitt dekket med et dekkglass, og avstanden mellom dekkglasset og objektglasset er kun 0,02 mm, så små celler som f.eks. bakterier kan observeres og telles med en oljenedsenkingsobjektiv. I tillegg til å bruke disse bakterietellerne, er det også en estimeringsmetode for direkte å observere forholdet mellom utstrykeområdet og synsfeltområdet under et mikroskop. Denne metoden brukes vanligvis til bakteriologisk undersøkelse av melk. Fordelen med mikroskop direkte tellemetode er at den er intuitiv, rask og enkel å betjene. Men ulempen med denne metoden er at de målte resultatene vanligvis er summen av døde og levende bakterier. For tiden er det noen metoder for å overvinne denne mangelen, for eksempel å kombinere levende bakterier som farger mikrokammerkultur (kort tid) og legge til celledelingshemmere for å oppnå formålet med å telle kun levende bakterier.
I dette eksperimentet ble et hemocytometer brukt som eksempel for å utføre direkte telling under et mikroskop. For bruksmetodene til de to andre bakterietellerne, se instruksjonene til hver produsent. Direkte telling under et mikroskop med et hemocytometer er en vanlig mikrobiell tellemetode. Tellebrettet er en spesiallaget glassrute, hvor fire slisser danner tre plattformer; den bredere plattformen i midten er delt i to halvdeler av en kort horisontal spalte, og hver side av plattformen er foret med et rutenett. Hvert rutenett er delt inn i ni store firkanter, og den midterste store firkanten er tellekammeret. Skalaen til tellerommet har generelt to spesifikasjoner, den ene er at en stor firkant er delt inn i 25 midterste ruter, og hver midterste rute er delt inn i 16 små ruter; den andre er at en stor firkant er delt inn i 16 midterste ruter, og hver midterste rute er delt inn i 25 små ruter, men uansett hva slags tellebrett er det 400 små ruter i hver stor firkant. Sidelengden til hver stor firkant er 1 mm, og deretter er arealet av hver stor firkant 1 mm 2. Etter at dekkglasset er dekket, er høyden mellom dekkglasset og lysbildeglasset 0,1 mm, så volumet av tellekammeret er 0,1 mm (en titusendels milliliter).
