Utvide fordelene med multifoton laserskanningsmikroskopi til å inkludere
Laserskanningsmultifotonmikroskop er en betydelig forbedring av optisk mikroskopi, hovedsakelig manifestert i evnen til å observere dype strukturer av levende celler, faste celler og vev, og oppnå klare og skarpe flerlags Z-plan-strukturer, nemlig optiske skiver. Konfokalt mikroskop bruker en laser lyskilde, som utvides for å fylle hele fokalplanet til objektivlinsen, og deretter konvergeres til veldig små punkter på brennplanet til prøven gjennom linsesystemet til objektivlinsen. I henhold til den numeriske blenderåpningen til objektivlinsen, er diameteren til det lyse lyspunktet omtrent 0. 25-0. 8 μ m, og dybden er omtrent 0. 5-1. 5 μ m. Størrelsen på konfokalpunktet bestemmes av mikroskopdesign, laserbølgelengde, objektive egenskaper, innstillinger for skanningsenhetstilstand og prøveegenskaper. Belysningsområdet og dybden til et feltmikroskop er stort, mens belysningen av et konfokalt mikroskop er fokusert på et samlingspunkt på fokalplanet. Den grunnleggende fordelen med konfokal mikroskopi er at den kan utføre fin optisk seksjonering på tykke fluorescerende prøver (opptil 5 0 μ m eller mer), med en tykkelse på omtrent 0,5 til 1,5 μ m. Serien med optiske skivebilder kan oppnås ved å bevege prøven opp og ned ved bruk av z-aksen trinnmotor i mikroskopet. Innsamlingen av bildeinformasjon styres i * * -planet, uten forstyrrelser fra signaler som sendes ut fra andre posisjoner på prøven. Etter å ha fjernet påvirkningen av bakgrunnsfluorescens og økt signal-til-støy-forholdet, forbedres kontrasten og oppløsningen av konfokale bilder betydelig sammenlignet med tradisjonelle feltbelysningsfluorescensbilder. I mange eksempler, intrikate strukturelle komponenter mellomvogner for å danne komplekse systemer, men når nok optiske seksjoner kan samles, kan vi bruke programvare for å rekonstruere dem i tre dimensjoner. Denne eksperimentelle metoden har blitt mye brukt i biologisk forskning for å belyse de komplekse strukturelle og funksjonelle sammenhengene mellom celler eller vev.
