Fluorescensmikroskopiprinsipper og strukturelle funksjoner
Fluorescensmikroskopi er bruken av en høy luminescenseffektivitet av punktet, gjennom filtrering av fargesystemet for å avgi en viss bølgelengde av lys (som ultrafiolett 3650 inn i eller fiolett-blå 4200 inn i) som eksitasjonslyset, eksitasjonen av fluorescerende materiale i prøven avgir en rekke forskjellige farger av fluorescens, og forstørres deretter gjennom objektivet og okularene for observasjon. På denne måten, i den sterke kontrastbakgrunnen, selv om fluorescensen er veldig svak, er den lett å identifisere, høy følsomhet, hovedsakelig brukt for studiet av cellestruktur og funksjon og kjemisk sammensetning. Den grunnleggende strukturen til et fluorescensmikroskop er sammensatt av et vanlig optisk mikroskop pluss noe tilbehør (som en fluorescenslyskilde, eksitasjonsfiltre, tofarget stråleseparator og blokkeringsfiltre, etc.). Fluorescerende lyskilde - vanligvis brukt ultrahøytrykks kvikksølvlampe (50-200W), som kan sende ut en rekke bølgelengder av lys, men hvert fluorescerende materiale har en sterkest fluorescenseksitasjonsbølgelengde, så behovet for å legge til eksitasjonsfiltre (vanligvis ultrafiolett, fiolett, blått og grønt eksitasjonsfilter), slik at bare en viss bølgelengde av eksitasjonslys gjennom bestråling av prøver, mens det andre lyset absorberes. Så det er nødvendig å legge til et eksitasjonsfilter (vanligvis ultrafiolett, fiolett, blått og grønt eksitasjonsfilter), slik at bare en viss bølgelengde av eksitasjonslys gjennom prøven, mens annet lys absorberes. Når hvert stoff blir bestrålt med eksitasjonslys, sender det ut synlig fluorescens med lengre bølgelengde enn det bestrålte lyset i løpet av svært kort tid. Fluorescens har spesifisitet, generelt svakere enn eksitasjonslyset, for å kunne observere den spesifikke fluorescensen, må objektivlinsen bak behovet for å legge til blokkering (eller undertrykkelse) velges å bruke.
Fluorescensmikroskop og vanlig mikroskopforskjell
1. Belysningsmetoden faller vanligvis, det vil si at lyskilden projiseres på prøven gjennom objektivlinsen;
2. Lyskilden er ultrafiolett lys, med kortere bølgelengde og høyere oppløsningsevne enn vanlige mikroskoper;
3. Det er to spesielle filtre, det ene foran lyskilden brukes til å filtrere ut synlig lys, og det mellom okularet og objektivlinsen brukes til å filtrere ut ultrafiolett lys for å beskytte det menneskelige øyet.
Fluorescensmikroskop er også et slags optisk mikroskop, hovedforskjellen er at eksitasjonsbølgelengden til de to er forskjellige. Dette bestemmer fluorescensmikroskopet og det vanlige optiske mikroskopets struktur og bruk av forskjellige metoder.
Fluorescensmikroskop er det grunnleggende verktøyet for immunfluorescenscytokjemi. Den er sammensatt av lyskilde, filterplatesystem og optisk system og andre hovedkomponenter. Den bruker en viss bølgelengde av lys for å stimulere prøven til å avgi fluorescens, som forstørres gjennom objektivlinsen og okularsystemet for å observere fluorescensbildet til prøven.
