Merknader og tips om bruk av flere fasekontrastmikroskoper
1) Installer fasekontrastenheten: fjern kondensatorlinsen til det vanlige mikroskopet, og installer kondensatorlinsen med en ringformet membran på et matchende mikroskop; fjern den vanlige objektivlinsen til mikroskopet, og erstatt den med en objektivlinse med en faseplate; bytt ut okularet med fokuseringsokularer for fasekontrastmikroskoper; spesielle grønne filtre (noen ganger ikke nødvendig) er plassert ved lysinngangen til lyskilden.
2) Lysjustering og fokus: Juster fokusokularet og tykkelsesjusteringsskruen til en hvit sirkel og en svart sirkel kan sees tydelig i synsfeltet. Den svarte sirkelen er fast, og den hvite sirkelen kan flyttes ved å justere skruen på kondensatorenheten, slik at den svarte sirkelen og den hvite sirkelen faller helt sammen. Ta av fokusokularet og erstatt det med det originale okularet til mikroskopet for å sjekke.
Analyse av problemer ved bruk av fasekontrastmikroskop
1. Påvirkning av prøvetykkelse Når man utfører fasekontrastobservasjon, bør tykkelsen på prøven være 5 μm eller tynnere. Når du bruker en tykkere prøve, er det øvre laget av prøven veldig tydelig, men det dype laget vil være uskarpt og forårsake faseskift-interferens. og lysspredning.
2. Påvirkning av dekkglass og lysglass Prøven må dekkes med et dekkglass, ellers er den lyse ringen på den ringformede diafragmaen og den mørke ringen på faseplaten vanskelig å overlappe. Fasekontrastobservasjon stiller også høye krav til glasskvaliteten til lysglass og dekkglass. Når det er riper, ujevn tykkelse eller ujevnheter, vil det oppstå lys ringforvrengning og faseinterferens. I tillegg, når lysbildet er for tykt eller for tynt, vil den lyse ringen på den ringformede membranen bli større eller mindre.
3. Halo- og fadingeffekt I avbildningsprosessen til fasekontrastmikroskop, når en struktur blir mørk på grunn av faseforsinkelse, er det ikke tap av lys, men et resultat av omfordeling av lys på bildeplanet. Så lys som tilsynelatende går tapt i mørke områder vil fremstå som en lys glorie rundt mørkere objekter. Dette er en ulempe ved fasekontrastmikroskopi, som hindrer observasjon av fine strukturer, og halofenomenet er mer alvorlig når den ringformede membranen er veldig smal. Et annet fenomen i fasekontrastmikroskopi er skyggeeffekten, som refererer til tap av kontrast ved kantene av et større område med samme faseforsinkelse når det observeres av fasekontrast.
4. Fasinversjon Når n'n er den lyse og mørke kontrasten i bildet akkurat motsatt, noe som kalles faseinversjon. Det er ugjenkjennelig når faseforskjellen δ=0, og kontrasten blir større med økningen av δ, og faseinversjonen vil vises når δ fortsetter å øke til en viss verdi. Når du bruker en objektivlinse med 90 prosent høy absorbansverdi (høy kontrast), er denne transformasjonsverdien omtrent 0.55λ, og når du bruker en objektivlinse med 70 prosent standard absorbansverdi, er den omtrent 0,33λ . Mål med høyere absorbansverdier bør brukes for å løse mindre optiske veiforskjeller.
