Stereofluorescensmikroskop bruk og forholdsregler
Bruksanvisning:
(1) Plasser materialarket på scenen.
(2) Slå på spenningsstabilisatoren til det fluorescerende mikroskopet. Trykk deretter på startgruppen for å tenne UV-lampen og ikke slå den av innen 15 minutter, og ikke start den igjen innen 3 minutter etter at den er slått av.
(3) Vri eksitasjonsfilteret til v, fargeseparasjonsfilteret til v, og velg et 495 eller 475nm blokkeringsfilter.
(4) Velg uvFL40, uvFL100 fluorescerende objektivmikroskop for mikroskopisk undersøkelse.
(5) Tilsett ikke-fluorescerende olje på objektglasset, bruk først 40 x, og bruk deretter 100 x fokusmikroskop for å sjekke. Fluorescens vises.
(7) Siden fluorescensen til fluorescerende stoffer gradvis svekkes med tiden når de blir bestrålt av ultrafiolett lys, bør synsfeltet endres ofte under mikroskopisk undersøkelse.
(8) uvFL10- eller uvFL20-mikroskoper med lav forstørrelse kan også brukes til å inspisere materialer (ingen fluorescerende olje tilsettes ved bruk av linser med lav effekt).
Opptaksmetode for fluorescensbilde:
Fluorescensbildet sett av fluorescensmikroskopet har både morfologiske egenskaper og fluorescensfarge og lysstyrke. Når du bedømmer resultatene, må de to kombineres for en helhetlig vurdering. Resultatene registreres basert på subjektive indikatorer, det vil si visuell observasjon av arbeidere. Som en generell kvalitativ observasjon, i utgangspunktet pålitelig. Med utviklingen av teknologi og vitenskap brukes objektive indikatorer for å registrere vurderingsresultater i ulik grad, for eksempel cellespektrofotometre, bildeanalysatorer og andre instrumenter. Imidlertid må resultatene som registreres av disse instrumentene også kombineres med subjektive vurderinger.
Fluorescensmikroskopfotografering er svært nødvendig for å ta opp fluorescensbilder. Siden fluorescens er lett å falme og svekke, er det nødvendig å registrere resultatene i sanntid. Metoden er i utgangspunktet den samme som for vanlig fotomikrografi. Du trenger bare å bruke høyhastighets fotosensitiv film som ASA200 eller høyere eller 24. over. Fordi ultrafiolett lys har en sterk effekt på fluorescensslukking, slik som FITC-markører, vil fluorescenslysstyrken reduseres med 50 prosent når det bestråles med ultrafiolett lys i 30 sekunder. Derfor, hvis eksponeringshastigheten er for lav, kan det fluorescerende bildet ikke tas. Generelle forskningsfluorescensmikroskoper har halvautomatiske eller helautomatiske fotomikrografisystemenheter.
Forholdsregler:
(1) Betjen strengt i samsvar med kravene i fabrikkinstruksjonene for fluorescensmikroskopet, og ikke endre programmet etter ønske.
(2) Inspeksjon bør utføres i et mørkt rom. Etter å ha kommet inn i mørkerommet, koble til strømforsyningen og tenn kvikksølvlampen med ultrahøytrykk i 5-15 minutter. Etter at det sterke lyset fra lyskilden er stabilt, er øynene fullstendig tilpasset mørkerommet, og begynner deretter å observere prøven.
(3) For å forhindre at ultrafiolette stråler skader øynene, bør vernebriller brukes når lyskilden justeres.
(4) Inspeksjonstiden er fortrinnsvis 1-2 timer hver gang. Hvis den overskrider 90 minutter, vil lysstyrken til ultrahøytrykkskvikksølvlampen gradvis avta og fluorescensen svekkes; etter at prøven er bestrålt med ultrafiolette stråler i 3-5 minutter, vil fluorescensen også bli betydelig svekket; derfor bør den maksimalt ikke overstige 2-2 timer. 3t.
(5) Levetiden til lyskilden til fluorescensmikroskopet er begrenset, og prøvene bør inspiseres samlet for å spare tid og beskytte lyskilden. Når været er varmt, bør vifter legges til for å spre varmen, og de nye pærene bør registreres fra begynnelsen av brukstiden. Når du vil bruke den igjen etter at lampen er slukket, må du vente til pæren er tilstrekkelig avkjølt før du tenner den. Unngå å tenne lyskilden flere ganger om dagen.
(6) Observer prøven umiddelbart etter farging, siden fluorescensen gradvis vil svekkes over tid. Hvis prøven oppbevares i en polyetylenplastpose ved 4 grader, kan fluorescenssvekkelsestiden bli forsinket og monteringsmidlet kan forhindres i å fordampe.
(7) Bedømmelsesstandard for fluorescenslysstyrke: den er generelt delt inn i fire nivåer, det vil si "ett" - ingen eller svak fluorescens kan sees. " pluss "—Bare tydelig synlig fluorescens kan sees. " pluss pluss "—Synlig og lys
