Strukturen og hovedkomponentene til et fluorescensmikroskop
(1) Lyskilde
I dag er en 200W kvikksølvlampe med ultrahøyt trykk ofte brukt som lyskilde. Den er laget av kvartsglass, med en sfærisk form i midten og en viss mengde kvikksølv fylt inni. Under drift fører utladningen mellom de to elektrodene til at kvikksølvet fordamper, og trykket inne i kulen øker raskt. Når kvikksølvet fordamper fullstendig, kan det nå 50-70 standard atmosfærisk trykk, som vanligvis tar omtrent 5-15 minutter. Luminescensen til kvikksølvlamper med ultrahøyt trykk er resultatet av utladningen mellom elektrodene, som kontinuerlig dissosierer og reduserer kvikksølvmolekyler og sender ut fotoner. Det avgir sterkt ultrafiolett og blåfiolett lys, som er tilstrekkelig til å eksitere forskjellige fluorescerende stoffer, derfor er det mye brukt i fluorescensmikroskoper.
Ultrahøytrykks kvikksølvlamper avgir også en stor mengde varmeenergi. Derfor må lamperommet ha gode varmeavledningsforhold og arbeidsmiljøtemperaturen bør ikke være for høy.
Den nye kvikksølvlampen med ultrahøyt trykk krever ikke høyspenning for å antennes i det tidlige bruksstadiet. Etter litt tids bruk må den startes med høyspenning (ca. 15000V). Etter start holdes arbeidsspenningen vanligvis på 50-60V, og arbeidsstrømmen er omtrent 4A. Gjennomsnittlig levetid for en 200W kvikksølvlampe med ultrahøyt trykk er omtrent 200 timer når den brukes i 2 timer hver gang. Jo kortere driftstid, jo kortere levetid. Hvis den brukes i bare 20 minutter én gang, reduseres levetiden med 50 %. Prøv derfor å minimere antall starter når du bruker. Lyseffektiviteten til en lyspære avtar gradvis under bruk. Etter at lyset slukker, må det vente på avkjøling før det startes på nytt. Etter å ha tent lyspæren, bør den ikke slås av umiddelbart for å unngå ufullstendig fordampning av kvikksølv og skade på elektroden. Vanligvis må den vente i 15 minutter. På grunn av det høye trykket og den sterke ultrafiolette strålingen fra ultrahøytrykkskvikksølvlampen, må lyspæren plasseres i lampekammeret før den tennes for å unngå øyeskade og eksplosjon under drift.
Kretsen til en ultrahøytrykks kvikksølvlampe (100W eller 200W) lyskilde og dens komponenter inkludert spenningstransformasjon, strømundertrykkelse og oppstart. Det er et system for å justere lyssenteret til pæren i lamperommet, med en aluminiumsbelagt konkav reflektor installert bak pæren og en lyssamlende linse installert i fronten.
Den innenlandsproduserte ultrahøytrykkskvikksølvlampen GCQ-200 har god ytelse og kan erstatte importerte pærer som HBO-200, med en gjennomsnittlig levetid på over 200 timer og en relativt lav pris.
En enkel og bærbar høyfargetemperatur brom wolfram fluorescerende lyskilde utviklet i Kina, med lite volum, lav vekt, lav effekt, dobbel bruk av AC og DC (med innebygd DC-strømforsyning), enkel å bære, praktisk å bruke , har blitt promotert og brukt.
(2) Fargefiltreringssystem
Fargefiltersystemet er en viktig del av et fluorescensmikroskop, bestående av en eksitasjonsfilterplate og en kompresjonsfilterplate. Modellen til filterplaten er ofte inkonsekvent blant produsentene. Filterplater er vanligvis oppkalt etter den grunnleggende fargetonen, med den første bokstaven som representerer fargetonen, den andre bokstaven representerer glasset, og tallet representerer modellegenskapene. Olympus mikroskop
(3) Objektiv linse
Ulike objektivlinser kan brukes, men bruk av akromatiske objektivlinser er egnet for fluorescens på grunn av deres ekstremt lave selvfluorescens og transmittansytelse (bølgelengdeområde). På grunn av det faktum at fluorescenslysstyrken til bildet i mikroskopets synsfelt er direkte proporsjonal med kvadratet av objektivets blenderåpningsforhold og omvendt proporsjonal med forstørrelsen, for å forbedre lysstyrken til fluorescensbildet, er en objektivlinse med et større blenderforhold bør brukes. Spesielt ved høy forstørrelse er virkningen svært betydelig. For prøver med utilstrekkelig fluorescens bør derfor en objektivlinse med høy blenderåpning brukes, kombinert med et så lavt okular som mulig (4 x, 5 x, 6,3 x, osv.).
(4) Refleksspeil
Det reflekterende laget av en reflektor er generelt belagt med aluminium fordi aluminium absorberer mindre ultrafiolett og synlig lys i det blå lilla området, med en refleksjon på over 90 %, mens sølv bare reflekterer 70 %; Vanligvis brukes flate reflektorer.
(5) Spotlight speil
Konsentratoren designet og laget spesielt for fluorescensmikroskopi er laget av kvartsglass eller annet glass som overfører ultrafiolett lys. Det finnes to typer mørkefeltspottere med distinkt synsfelt. Det er også en differensiell fluorescenskonsentrator.
(6) Fallende lysanordning
Den nye typen fallende lysanordning reflekterer de kortere bølgelengdedelene (ultrafiolett og lilla blå) fra lyskilden til interferensspektrofotometerfilteret på grunn av egenskapene til belegget på filteret. Når filteret vender mot lyskilden i en 45 graders vinkel. Når den vippes, rettes den vertikalt mot objektivlinsen og rettet mot prøven gjennom objektivlinsen, noe som får prøven til å bli eksitert. På dette tidspunktet fungerer objektivlinsen direkte som en kondensator. Samtidig er de lange delene av filteret (grønne, gule, røde osv.) transparente for filteret, slik at de ikke reflekteres i retning av objektivet. Filteret fungerer som en eksitasjonsfilterplate, og fordi fluorescensen til prøven er i det synlige lysets lange bølgelengdeområdet, kan det observeres gjennom filteret og nå målet. Lysstyrken til fluorescensbildet øker med forstørrelse, og er sterkere enn den transmitterte lyskilden ved høy forstørrelse. I tillegg til sin funksjon som en transmissiv lyskilde, er den mer egnet for direkte observasjon av ugjennomsiktige og semi-transparente prøver, som tykke plater, filtermembraner, kolonier, vevskulturprøver osv. De siste årene har nyutviklede fluorescensmikroskoper ofte bruke fallende lysenheter, kjent som fallende lysfluorescensmikroskoper.
