Hva er forskjellene mellom fluorescensmikroskopi og invertert mikroskopi
Mikroskop er et viktig instrument i cellekultur og relaterte derivateksperimenter. For tiden finnes det ulike typer mikroskoper på markedet, og det er en utfordring å velge et mikroskop som dekker behovene og egner seg. Nedenfor vil vi introdusere prinsippene for inverterte mikroskoper og fluorescensmikroskoper som alle kan velge mellom.
Det inverterte mikroskopet, som et vanlig mikroskop, består hovedsakelig av tre deler: mekanisk del, belysningsdel og optisk del.
Sammensetningen av et invertert mikroskop er den samme som for et vanlig oppreist mikroskop, bortsett fra at objektivlinsen og lyssystemet er reversert, med førstnevnte under scenen og sistnevnte over scenen.
Denne strukturen utvider den effektive avstanden mellom lyskastersystemet og scenen betydelig, noe som gjør det lettere å plassere tykkere observasjonsverktøy som kulturskåler og cellekulturflasker (selvfølgelig kan glassglass også brukes), mens arbeidsavstanden mellom objektivlinse og materialet trenger ikke være veldig stort.
Invertert mikroskop brukes av medisinske og helseinstitusjoner, universiteter og forskningsinstitutter for å observere mikroorganismer, celler, bakterier, vevskulturer, suspensjoner, sedimenter osv. Det kan kontinuerlig observere prosessen med celle- og bakterieproliferasjon og -deling i kulturmedium, og kan fange opp enhver form for denne prosessen.
Mye brukt i felt som cytologi, parasitologi, onkologi, immunologi, genteknologi, industriell mikrobiologi og botanikk.
Fluorescensmikroskopi brukes til å studere absorpsjon, transport, distribusjon og lokalisering av stoffer i celler.
For det testede objektet er det to måter å generere fluorescens på: spontan fluorescens, som sendes direkte ut av ultrafiolett bestråling; Sekundær fluorescens oppstår når det observerte objektet behandles med fluorescerende fargestoffer og eksponeres for ultrafiolett lys før det avgir fluorescens.
Noen stoffer i celler, som klorofyll, produserer spontan fluorescens etter å ha blitt utsatt for ultrafiolett stråling; Noen stoffer i seg selv avgir kanskje ikke fluorescens, men hvis de er farget med fluorescerende fargestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også avgi sekundær fluorescens under ultrafiolett stråling.
Et fluorescensmikroskop bruker en punktlyskilde med høy lyseffektivitet for å sende ut en viss bølgelengde av lys (UV 365nm eller UV-blått 420nm) gjennom et fargefiltreringssystem som eksitasjonslys, som eksiterer de fluorescerende stoffene i prøven til å avgi forskjellige farger av fluorescens. Etter det observeres det gjennom forstørrelse av objektivlinsen og okularet.
På denne måten, selv med svak fluorescens, er den lett gjenkjennelig og svært følsom under sterk kontrasterende bakgrunn. Den brukes hovedsakelig til å studere cellestruktur, funksjon og kjemisk sammensetning.
