Hva er forskjellen mellom fluorescens og laser konfokal mikroskopi?
fluorescensmikroskop
1. Fluorescensmikroskop er en enhet som bruker ultrafiolett lys som lyskilde for å lyse opp objektet som testes, noe som får det til å avgi fluorescens, og deretter observere formen og posisjonen til objektet under mikroskopet. Fluorescensmikroskopi brukes til å studere absorpsjon, transport, distribusjon og lokalisering av stoffer i celler. Noen stoffer i celler, som klorofyll, kan avgi fluorescens etter å ha blitt utsatt for ultrafiolett stråling; Noen stoffer i seg selv kan ikke avgi fluorescens, men hvis de er farget med fluorescerende fargestoffer eller fluorescerende antistoffer, kan de også avgi fluorescens under ultrafiolett stråling. Fluorescensmikroskopi er et av verktøyene for kvalitativ og kvantitativ forskning på disse stoffene.
2. Prinsippet for fluorescensmikroskop:
(A) Lyskilde: Lyskilden sender ut lys med forskjellige bølgelengder (fra ultrafiolett til infrarødt).
(B) Lyskilde for eksitasjonsfilter: Overfører lys med en bestemt bølgelengde som kan produsere fluorescens i prøven, mens den blokkerer lys som er ubrukelig for eksitasjonsfluorescens.
(C) Fluorescerende prøver: vanligvis farget med fluorescerende pigmenter.
(D) Blokkeringsfilter: overfører selektivt fluorescens ved å blokkere eksitasjonslys som ikke har blitt absorbert av prøven, og noen bølgelengder overføres også selektivt i fluorescens. Et mikroskop som bruker ultrafiolett lys som lyskilde for å sende ut fluorescens fra det bestrålte objektet. Elektronmikroskopet ble først satt sammen av Knorr og Harroska i Berlin, Tyskland i 1931. Denne typen mikroskop bruker en høyhastighets elektronstråle i stedet for en lysstråle. På grunn av den mye kortere bølgelengden til elektronstrømmen sammenlignet med lysbølger, kan forstørrelsen av elektronmikroskopet nå 800000 ganger, med en minste oppløsningsgrense på 0,2 nanometer. Skanningselektronmikroskopet, som begynte å bli brukt i 1963, lar folk se de små strukturene på overflaten av objekter.
3. Bruksområde: Brukes til å forstørre bilder av små objekter. Vanligvis brukt til observasjon av biologi, medisin, mikroskopiske partikler, etc.
konfokalt mikroskop
1. Et konfokalt mikroskop legger til en semireflekterende linse til den reflekterte lysbanen, som bøyer det reflekterte lyset som allerede har passert gjennom linsen i andre retninger. Det er en baffel med et nålhull i brennpunktet, og det lille hullet er plassert i brennpunktet. Bak baffelen er et fotomultiplikatorrør. Det kan tenkes at det reflekterte lyset før og etter deteksjonslysfokuspunktet ikke kan fokuseres på det lille hullet gjennom dette konfokale systemet og vil bli blokkert av ledeplaten. Så fotometeret måler intensiteten av reflektert lys ved brennpunktet.
2. Prinsipp: Tradisjonelle optiske mikroskoper bruker feltlyskilder, og bildet av hvert punkt på prøven vil bli påvirket av diffraksjon eller spredt lys fra nabopunkter; Laserskannende konfokalmikroskop bruker en laserstråle for å danne en punktlyskilde gjennom et opplyst pinhole for å skanne hvert punkt i brennplanet til prøven. Det opplyste punktet på prøven avbildes ved deteksjonsnålhullet, og mottas punkt for punkt eller linje av et fotomultiplikatorrør (PMT) eller en termoelektrisk koblingsenhet (cCCD) etter deteksjonsnålhullet, og danner raskt et fluorescerende bilde på dataskjermen skjerm. Belysningsnålhullet og deteksjonsnålhullet er konjugert i forhold til fokalplanet til objektivlinsen. Punktene på fokalplanet er samtidig fokusert på belysningsnålhullet og emisjonsnålhullet, og punkter utenfor fokalplanet vil ikke bli avbildet ved deteksjonsnålhullet. Dette resulterer i et konfokalt bilde som representerer det optiske tverrsnittet av prøven, og overvinner ulempen med uskarpe bilder i konvensjonell mikroskopi.
3. Bruksområder: involverer medisin, dyre- og planteforskning, biokjemi, bakteriologi, cellebiologi, vev og embryo, matvitenskap, genetikk, farmakologi, fysiologi, optikk, patologi, botanikk, nevrovitenskap, marinbiologi, materialvitenskap, elektronisk vitenskap, mekanikk, petroleumsgeologi og mineralogi.
