Forskjellen mellom fluorescensmikroskop og laserkonfokalmikroskop
fluorescerende mikroskop
1. Fluorescensmikroskopet bruker ultrafiolett lys som lyskilde, som brukes til å bestråle det detekterte objektet for å få det til å avgi fluorescens, og deretter observere formen og posisjonen til objektet under mikroskopet. Fluorescensmikroskop brukes til å studere absorpsjon, transport, distribusjon og plassering av kjemiske stoffer i celler. Noen stoffer i celler, som klorofyll, kan fluorescere etter å ha blitt bestrålt av ultrafiolette stråler; Andre stoffer kan ikke fluorescere av seg selv, men de kan fluorescere etter å ha blitt farget med fluorescerende fargestoffer eller fluorescerende antistoffer og bestrålt av ultrafiolette stråler. Fluorescensmikroskop er et av verktøyene for kvalitativ og kvantitativ forskning på disse stoffene.
2, fluorescensmikroskopprinsipp:
(a) Lyskilde: Lyskilden utstråler lys med forskjellige bølgelengder (fra ultrafiolett til infrarødt).
(b) Lyskilde for eksitasjonsfilter: sender lys med en spesifikk bølgelengde som kan få prøven til å fluorescere, mens den blokkerer lys som er ubrukelig for eksitasjonsfluorescens.
(c) Fluorescerende prøver: vanligvis farget med fluorescerende pigmenter.
(d) Blokkerende filter: blokkerer eksitasjonslys som ikke absorberes av prøven for selektivt å overføre fluorescens, og noen bølgelengder i fluorescensen overføres også selektivt. Et mikroskop som bruker ultrafiolett lys som lyskilde for å få det bestrålte objektet til å avgi fluorescens. Elektronmikroskopet ble først satt sammen av Knohl og Ha Roska i Berlin i 1931. Dette mikroskopet bruker en høyhastighets elektronstråle i stedet for en lysstråle. Fordi bølgelengden til elektronstrømmen er mye kortere enn lysbølgen, kan forstørrelsen til elektronmikroskopet nå 800 tusen ganger, og minimumsoppløsningsgrensen er 0,2 nanometer. Skanningselektronmikroskopet, som begynte å bli brukt i 1963, kan få folk til å se de bittesmå strukturene på overflaten av objekter.
3. Bruksområde: brukes til å forstørre bildet av små gjenstander. Det brukes generelt til observasjon av biologi, medisin og mikroskopiske partikler.
Konfokalt mikroskop
1. Konfokalmikroskop legger til en semi-reflekterende semi-linse på den optiske banen til reflektert lys, som bryter det reflekterte lyset som har passert gjennom linsen til andre retninger. Ved fokuset er det en ledeplate med et nålhull, og nålehullet er plassert ved fokuset. Bak baffelen er et fotomultiplikatorrør. Det kan tenkes at det reflekterte lyset før og etter fokuset til deteksjonslyset passerer gjennom dette konfokale systemet, og vil ikke bli fokusert på det lille hullet, men vil bli blokkert av ledeplaten. Så fotometeret måler intensiteten av reflektert lys ved fokuset.
2. Prinsipp: Det tradisjonelle optiske mikroskopet bruker feltlyskilden, og bildet av hvert punkt på prøven vil bli forstyrret av diffraksjonen eller spredt lys fra de tilstøtende punktene; Konfokalmikroskopet med laserskanning skanner hvert punkt i brennplanet i prøven ved å bruke punktlyskilden dannet av laserstrålen som passerer gjennom belysningsnålhullet. Det bestrålte punktet på prøven avbildes ved deteksjonsnålhullet, som mottas punkt for punkt eller linje for punkt av fotomultiplikatorrør (PMT) eller kaldkoblet enhet (cCCD) etter å ha oppdaget nålehullet, og et fluorescerende bilde dannes raskt på dataskjermen. Belysningsnålhullet og deteksjonsnålhullet er konjugert med hensyn til fokalplanet til objektivlinsen, og punktene på fokalplanet fokuserer på belysningsnålhullet og emisjonsnålhullet samtidig, og punktene utenfor brennplanet vil ikke avbildes ved deteksjonsnålhullet, slik at det oppnådde konfokale bildet er det optiske tverrsnittet av prøven, som overvinner defekten med uskarpt bilde av det vanlige mikroskopet.
3. Bruksområder: involverer medisin, dyre- og planteforskning, biokjemi, bakteriologi, cellebiologi, vev og embryo, matvitenskap, genetikk, farmakologi, fysiologi, optikk, patologi, botanikk, nevrovitenskap, marinbiologi, materialvitenskap, elektronisk vitenskap, mekanikk, petroleumsgeologi og mineralogi.
