Metoder for fremstilling av prøver for optisk og elektronmikroskopi av filmer
Mikrofilmmetoden inkluderer generelt fire kategorier: seksjoneringsmetode, generell forseglingsmetode, belegningsmetode og pressemetode.
①Skjærmetode. Optisk mikroskop skive tykkelse mellom 2 til 25 mikron, generelle plante-og dyrematerialer, er skiven ca 10 mikron tykk er passende. Seksjoneringsmetoden varierer i henhold til de forskjellige innstøpningsmidlene. Vanligvis brukt er parafinseksjoneringsmetoden, bomullslimseksjoneringsmetoden, frossenseksjoneringsmetoden og glykolmetakrylatmetoden (referert til som GMA-metoden). Parafinseksjoneringsmetoden inkluderer trinnene med fiksering, innstøping, seksjonering, farging, dehydrering og forsegling. Nøkkelen er å legge inn biomaterialet i parafinvoks, og bruke parafinvoks som støtte for å kutte biomaterialet nedsenket i voksblokken i ideelle tynne skiver. Operasjonsprosessen er som følger: fiksering → vasking av vann → trinnvis fra lav til høy konsentrasjon alkoholdehydrering → xylentransparens → voksneddykking → innstøping → seksjonering → lapping → xylenavvoksing → trinnvis fra høy til lav konsentrasjon alkoholbehandling, og til slutt overgang til vann → farging → trinnvis fra lav til høy konsentrasjon alkoholdehydrering → xylentransparens → forsegling med harpikslim. De grunnleggende trinnene som er involvert er de samme i alle typer filmteknikker.
② Integrert forseglingsmetode. Brukes for enkeltceller, bittesmå organismer eller spredte organer av helmontert filmmetoden. Denne metoden krever også ulike trinn med fiksering, farging, dehydrering, gjennomsiktighet og forsegling. Denne metoden brukes til fremstilling av munndelene til snørevinger og insekter.
Smøremetode. En fremstillingsmetode der en lett dispergert biologisk prøve belegges på et objektglass. Blodprøver er et eksempel.
④Trykkmetode. Det naturlige, lett spredte vevet eller lett spredte vev etter behandling, som dyrespermatocytter, rotspissceller, etc. på objektglasset, pluss et dekkglass, og deretter kraftig knuser vevet, slik at cellene eller intracellulære strukturer sprer seg til et lag av filmmetoder. Pressmetoden brukes ofte for å observere kromosomer, vanligvis farget med magentaacetat, lavrød og karbonsyrerød.
