Fordeler og ulemper med multifoton laser skanningsmikroskopi
Multi-Photon Laser Scanning Microscopy er en eksperimentell metode basert på laserskanningsmikroskopteknologien, som gir mer **optisk seksjoneringsevne i 3D-observasjon. Multifotonfluorescenseksitasjonsmetoden bruker lange bølgelengder av rødt eller nær-infrarødt lys for å skaffe høyoppløselige fluorescerende bilder av prøver med minimalt dreping av aktive prøver, noe som gjør den egnet for avbildning av levende celler, spesielt tykt levende vev som hjerneskiver, embryoer, hele organer og til og med hele organismer.
Fordelene er som følger:
1, bruk av rødt lys eller infrarødt lys eksitasjon, lysspredning er liten(spredningen avlitenpartikler og bølgelengden til fjerde potens av det inverse forholdet).
2, krever ikke et nålhull, kan samle flere spredte fotoner fra avbildningstverrsnittet.
3, kan nålhullet ikke skille mellom de spredte fotonene som sendes ut av det ufokuserte området eller fokusområdet, multi-foton i det dype bildesignal-til-støyforholdet er bra.
4, enkeltfotoneksitasjon av ultrafiolett eller synlig lys som brukes i strålen for å nå fokalplanet før prøven lett absorberes og dempes, ikke lett til dyp eksitasjon.
5, i den biologiske mikroskopobservasjonen, * det første hensynet er ikke å skade den aktive tilstanden til selve organismen, for å opprettholde vann, ionekonsentrasjon, oksygen og næringssirkulasjon. Ved lysobservasjoner må både termisk energi og fotonenergi forbli i cellen uten å skade mengden av bestråling, lysenergi.
6, multi-foton mikroskop har også mange fordeler. Som tredimensjonal oppløsning, dybdeinntrengning, i spredningseffektivitet, bakgrunnslys, signal-til-støy-forhold, kontroll, etc., er det tidligere lasermikroskoper som ikke har eller har uforlignelige utover egenskapene.
Multi-foton konfokalt laserskanningsmikroskop har blitt utvidet til ulike forsknings- og bruksområder. Den er i stand til tredimensjonal ikke-destruktiv observasjon av prøver i deres naturlige tilstand, og kan forbedre oppløsningen og signal-til-støy-forholdet til systemet. Ved å bruke endring av materialegenskaper etter multi-fotoneksitasjon, er det også mulig å oppnå tredimensjonal høydedatalagring og tredimensjonal mikrofabrikasjon i alle retninger, som har en høy bruksverdi. Det kan antas at med videreutvikling av maskineri, materialer, laserteknologi og andre teknologier relatert til multifoton konfokal mikroskopi, vil multifoton konfokal laserskanning mikroskop være større utvikling og bredere anvendelse.
Ulempene er som følger:
1, bare fluorescensavbildning.
2, hvis prøven inkluderer kromoforer som kan absorbere eksitasjonslyset, som for eksempelpigmenter, prøvenkan bli termisk skadet.
3, er oppløsningen noe redusert, selv omden kan forbedres ved samtidig bruk av konfokal blenderåpning, mendet vil være signaltap.
4. Kostnaden for multifoton skanningsmikroskopi er høy på grunn av begrensningen av dyre ultraraske lasere.
