Forskjellen mellom transmisjonsfluorescensmikroskopi og refleksjonsfluorescensmikroskopi
1. Transmisjonsfluorescensmikroskop: Eksitasjonslyskilden sendes gjennom prøvematerialet gjennom en kondensator for å eksitere fluorescens. Vanlige mørkefeltkonsentratorer, eller vanlige konsentratorer, kan brukes til å justere reflektoren for å konvertere eksitasjonslys og sidelys til prøven. Dette er et relativt gammeldags fluorescensmikroskop. Fordelen er sterk fluorescens ved lav forstørrelse, mens ulempen er at fluorescensen svekkes med økende forstørrelse. Derfor er det bedre å observere større prøvematerialer.
2. Fallende stråle fluorescensmikroskop: Dette er en ny type fluorescensmikroskop som har utviklet seg i moderne tid. I motsetning til den forrige, faller eksitasjonslyset ned fra objektivlinsen på overflaten av prøven, ved å bruke den samme objektivlinsen som belysningskondensatoren og objektivlinsen for å samle fluorescens. En stråleseparator med to farger må legges til den optiske banen, som danner en 45 graders vinkel med fotouran. Eksitasjonslyset reflekteres inn i objektivlinsen og samles på prøven. Fluorescensen generert av prøven og eksitasjonslyset som reflekteres fra overflaten av objektivlinsen og dekkglasset går samtidig inn i objektivlinsen og går tilbake til tofargestråleseparatoren, og skiller eksitasjonslyset og fluorescensen. Det gjenværende eksitasjonslyset blir deretter absorbert av blokkeringsfilteret. Hvis forskjellige kombinasjoner av eksitasjonsfiltre, tofargede stråleseparatorer og blokkeringsfiltre brukes, kan de møte behovene til forskjellige fluorescerende reaksjonsprodukter. Fordelene med dette fluorescerende mikroskopet er ensartet synsfeltbelysning, klar bildebehandling og sterkere fluorescens med høyere forstørrelse.
Fordelene og ulempene med transmisjonsfluorescensmikroskopi
Lyskilde: Høytrykks kvikksølvlampe eller halogenlampe.
Spotlight speil: Bruke en mørk felt spotlight for å skille eksitasjon og fluorescens.
Objektivlinse: Alle typer objektivlinse kan brukes.
Prøve: Tynne prøver er mer egnet for overføringsobservasjon.
Fordeler: ① På grunn av bruken av en mørk feltkondensator, kan ikke eksitasjonslyset komme inn i objektivlinsen, noe som gjør det enkelt å danne en mørk bakgrunn og oppnå god kontrast, og enhver objektivlinse kan brukes til observasjon. ② Når du bruker et objektiv med lav forstørrelse, er det lysere enn et reflekterende fluorescensmikroskop.
Ulempe: Sentrum og høyde på spotlighten må justeres riktig, ellers kan det ikke oppnås et lyst fluorescerende bilde. På grunn av brennviddebegrensningen til det mørke feltlyset, kan ikke tykke glassplater brukes. Belysningsområdet i synsfeltet bør ikke være for stort, ellers kan det føre til at fluorescensfargen til den fluorescerende prøven falmer. Tykke eller ugjennomsiktige prøver er ikke egnet.
