Den spesielle strukturen til et fluorescensmikroskop inkluderer:
(I) Fargefiltersystem
Fargefilteret er en viktig del av fluorescensmikroskopet, dets kjernekomponenter ved eksitasjonslysfilteret (første barrierefilter), emisjonslysfilteret (andre barrierefilter) og halvtransparent og halvt anti-filter (strålesplittende speil) sammensetning . Ulike produsenter av fargefiltermodeller, navnet er ofte ikke ensartet.
1. Eksitasjonslysfilter og emisjonslysfilter: i henhold til lyskilden og egenskapene til fluorokromen, velg vanligvis følgende tre typer matching, for å gi et visst bølgelengdeområde for eksitasjonslyset, og få prøveeksitasjonen av fluorescens gjennom okularet til avbildningen.
UV-eksitasjon: Eksitasjonslysfilteret tillater overføring av UV-lys og blokkerer passasjen av synlig lys over 400nm. Det tilsvarende emisjonsfilteret tillater passasje av blått lys, som vises blått i synsfeltet, f.eks. for DAPI-farging.
Eksitering av blått lys: Eksiteringslysfilteret lar blått lys passere gjennom, og blokkerer andre bølgelengder av lys. Det tilsvarende emisjonsfilteret tillater passasje av grønt lys, f.eks. for GFP-fargingsmarkører.
Grønn eksitasjon: Eksitasjonsfilteret lar grønt lys passere gjennom, og blokkerer andre bølgelengder. Det tilsvarende emisjonsfilteret lar vanligvis rødt lys slippe gjennom, f.eks. Rhodamine-farging.
2. Halvt gjennomsiktig og halvt reflekterende filter: dens rolle er å fullstendig blokkere eksitasjonen av lys gjennom refleksjonen; og gjennom det tilsvarende bølgelengdeområdet til det utsendte lyset. Dens modell og eksitering av lysfiltre og emisjon av lysfiltre tilsvarer.
(B) objektivlinse og okular
En rekke objektivlinser kan brukes, men * godt valg av symmetrisk, akromatisk objektivlinse, på grunn av dens autofluorescens er svært liten og lystransmisjonsegenskaper (bølgelengdeområde) egnet for fluorescens. Siden fluorescenslysstyrken til bildet i mikroskopets synsfelt er proporsjonal med kvadratet av objektivets snutehastighet og omvendt proporsjonal med forstørrelsen, så for å forbedre lysstyrken til fluorescensbildet, bør objektivet med stor snutehastighet bli brukt. Spesielt for fluorescens er ikke sterk nok prøver, bør bruke en stor munnhastighet, høy lysoverføring objektiv, med så lavt som mulig med okularet.
(C) andre optiske enheter
Reflektor, dets reflekterende lag er generelt belagt med aluminium, fordi aluminium på ultrafiolett og synlig lys absorpsjon av blå-fiolett område mindre, reflekterer opptil 90% eller mer (mens reflektiviteten til sølv er bare 70%). Flatreflekser brukes vanligvis. Spotlight speil, designet og produsert spesielt for fluorescensmikroskopi spotlight speil laget av kvartsglass eller annet UV-transparent glass. Fallende lysenhet, som i tillegg til funksjonen til overført lyskilde, er mer egnet for ugjennomsiktige og gjennomskinnelige prøver, for eksempel tykk film, filtermembran, koloni, vevskultur og andre prøver for direkte observasjon. I de siste årene har utviklingen av en ny type fluorescensmikroskop ved hjelp av fallende lysenhet, kalt fallende fluorescensmikroskop.
(D) lyskilde
I dag brukes 50 eller 100W høytrykks kvikksølvlampe som lyskilde. Arbeid ved at de to elektrodene utlades, forårsaket av kvikksølvfordampning, stiger lufttrykket raskt (denne prosessen tar vanligvis omtrent 5 ~ 15 minutter), og i prosessen med emisjon av lyskvanter er bølgelengden til det frigjorte lyset tilstrekkelig til å eksitere alle typer fluorescerende stoffer brukes derfor ofte til fluorescensmikroskopi.
Kvikksølvlamper har en relativt kort levetid, vanligvis 200 timer, og som svar på denne levetidsbegrensningen har en ny fluorescerende lyskilde, X-Cite, blitt mye brukt på grunn av sin lange levetid på 2000 timer og den fleksible bruken. - ingen forvarming er nødvendig, og den er klar til bruk rett ut av esken.
