Eksperimentelle prinsipper for mikrobiell mikroskopi direkte tellemetode
Direkte telling under mikroskop ved hjelp av et hemocytometer er en vanlig metode for telling av mikroorganismer. Fordelen med denne metoden er at den er intuitiv og rask. Plasser den passende fortynnede bakteriesuspensjonen (eller sporesuspensjonen) i tellekammeret mellom objektglasset og dekkglasset på hemocytometeret, og tell under et mikroskop. Siden volumet til tellekammeret er fast (0,1 mm2), kan det konverteres til det totale antallet mikroorganismer per volumenhet basert på antall mikroorganismer observert under mikroskopet. Siden denne metoden teller det totale antallet levende og døde bakterier, kalles den også metoden for total bakterietelling.
Et hemocytometer er vanligvis et spesielt lysbilde med fire spor som danner tre plattformer. Den midterste plattformen er delt i to halvdeler av et kort horisontalt spor. Det er et firkantet rutenett inngravert på plattformen på hver side. Hvert rutenett er delt inn i ni store ruter. Den store firkanten i midten er tellerommet. Tellingen av mikroorganismer foregår i tellekammeret. Strukturen til hemocytometeret er vist i figur Ⅷ-1.
Skalaen til tellekammeret har generelt to spesifikasjoner. Den ene er en stor firkant delt inn i 16 mellomstore firkanter, og hver mellomstore firkant er delt inn i 25 små firkanter (Figur Ⅷ-2); den andre er en stor firkant. Det firkantede rutenettet er delt inn i 25 mellomstore firkanter, og hver mellomstor rute er delt inn i 16 små ruter (Figur VIII-1, C). Men uansett hva slags tellebrett det er, er antallet små ruter i hver store rute det samme, det vil si 16×25=400 små ruter, som vist i figur Ⅷ-2.
Sidelengden på hver stor firkant er 1 mm, så arealet til hver stor firkant er 1 mm2. Etter at dekkglasset er dekket, er høyden mellom objektglasset og dekkglasset 0,1 mm, så volumet til tellekammeret er 0,1 mm3.
Når du teller, teller du vanligvis det totale antallet bakterier i fem mellomstore firkanter, finn deretter gjennomsnittsverdien for hver midterste firkant, og multipliser med 16 eller 25 for å få det totale antallet bakterier i en stor firkant, og beregn deretter Konverter til totalt antall bakterier i 1 ml bakterieoppløsning.
