Måling av vevsblokkvolum ved hjelp av biologiske mikroskoper
Så langt er kryofiksering, frosset ultra-tynt snitt og fryse-tørking rutinemetoder for vevs- og cellerøntgenmikroskopi-. Vennligst oppgi følgende detaljer om denne metoden:
Et biologisk mikroskop med spotlight kan flytte spotlighten opp og ned for å oppnå moderat lysstyrke, og blenderåpningen til den variable blenderåpningen kan også endres for å oppnå moderat lysstyrke. Hvis lyset er fra solen, kan spotlyset heves passende og blenderåpningen til det variable lyset kan forstørres på passende måte. Hvis lyset er for sterkt, kan spotlyset senkes hensiktsmessig, og blenderåpningen i krysset kan reduseres hensiktsmessig. Hvis du fortsatt føler deg blendende i denne situasjonen, kan du velge å plassere et passende filter på braketten under rampelyset. Denne eiken kan oppnå en lysstyrke som tilfredsstiller deg. Å justere de øvre og nedre posisjonene til spotlighten kan selvfølgelig endre blenderstørrelsen på lysavlesningen og velge passende filtre, noe som krever en viss periode med øvelse og erfaring.
Et svært viktig tema i biologisk mikroskopi er prosessen med å ta prøver og isolere celler. Etter fryse-tørking og harpiksinnstøping (FD), må de frosne ultra-tynne delene behandles nøye for å sikre at innholdet på 65 elementer i hver del ikke blir skadet under observasjon og analyse. På grunn av de mange trinnene og de høye kostnadene som er involvert i røntgenmikroanalyse, er det beklagelig å trekke uriktige konklusjoner hvis de analyserte cellene er skadet eller døde etter langvarig og fler-behandling. Myokardcellene separert ved gelatinasebehandling har to former, den ene er lang stav-formet og den andre er sirkulær. Sistnevnte refererer til døende celler som blir skadet under prosessen med celleseparasjon.
Innholdet og fordelingen av elektrolytter i disse to celletypene er svært forskjellige under et biologisk mikroskop. Na er svært høyt og K er ekstremt lavt i sirkulære kardiomyocytter, og konsentrasjonen av Ca i lineære dendritter er svært høy. Etter verifisering med andre analytiske metoder er det bevist at høy Na og lav K i sirkulære celler og høy Ca i mitokondrier er et resultat av membranskade under celleseparasjon. Kaldfikseringsmetoden for celler og vev innebærer ofte først bråkjøling og deretter lagring i flytende nitrogen. Slokkefiksering er avgjørende for konserveringseffekten. Levende celler eller ferske vev er rike på vann, og når de slukkes, blir delene av cellene eller vevene som kommer i direkte kontakt med kjølemediet (spesielt ved bruk av flytende nitrogen til kjøling) ofte frosset og fiksert først, og danner et "skall" som hindrer den sentrale delen av cellene i å knuses og fikseres. Derfor, når man utfører røntgenmikroanalyse, finner man ofte at iskrystaller finnes i den sentrale delen av større celler. For å forhindre at denne situasjonen oppstår, brukes et stoff med et smeltepunkt høyere enn flytende nitrogen, men lavere med 806c, som kjølemiddel. Det finnes mange av disse stoffene, men de er enkle å få tak i og det rimeligste er konsentrert propan (kokepunkt 42.120c, smeltepunkt 187.10c, molekylvekt 44.1), som også har en rask avkjølingshastighet. Men ulempen er at den er brannfarlig.
