Prinsippene og strukturelle egenskapene til fluorescensmikroskoper
Fluorescensmikroskop bruker en svært effektiv punktlyskilde for å sende ut en viss bølgelengde av lys (som ultrafiolett lys 3650 eller lilla blått lys 4200) gjennom et fargefiltersystem som eksitasjonslys, som eksiterer fluorescerende stoffer i prøven til å avgi forskjellige farger av fluorescens gjennom objektivet og deretter observerer objektivet. På denne måten, selv med svak fluorescens i sterk bakgrunn, er den lett å gjenkjenne og har høy følsomhet. Den brukes hovedsakelig til studiet av cellestruktur, funksjon og kjemisk sammensetning. Den grunnleggende strukturen til et fluorescensmikroskop er sammensatt av et vanlig optisk mikroskop og noe tilbehør som en fluorescerende lyskilde, eksitasjonsfilter, dobbel fargestråledeler og blokkeringsfilter. Fluorescerende lyskilde - bruker vanligvis ultra-høytrykkskvikksølvlamper (50-200W), som kan sende ut lys med forskjellige bølgelengder, men hvert fluorescerende stoff har en eksitasjonslysbølgelengde som gir den sterkeste fluorescensen. Derfor må eksitasjonsfiltre (vanligvis ultrafiolette, lilla, blå og grønne eksitasjonsfiltre) legges til for å la bare en viss bølgelengde av eksitasjonslys passere gjennom og bestråle prøven, samtidig som alt annet lys absorberes. Etter å ha blitt bestrålet med eksitasjonslys avgir hvert stoff synlig fluorescens med en bølgelengde som er lengre enn bestrålingsbølgelengden på svært kort tid. Fluorescens har spesifisitet og er generelt svakere enn eksitasjonslys. For å observere spesifikk fluorescens, må et blokkerende (eller undertrykkende) filter legges bak objektivlinsen.
Dens funksjoner er todelt: for det første å absorbere og blokkere eksitasjonslys fra å komme inn i okularet for å unngå forstyrrende fluorescens og skade øynene; for det andre å velge og tillate spesifikk fluorescens å passere gjennom, og vise en spesifikk fluorescerende farge. To typer filtre må brukes i kombinasjon.
